人抗釀酒酵母抗體(ASCA)酶聯免疫分析試劑盒操作步驟：

1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體phospho-ASK1 (Ser1033) 0.1ml

有絲分裂激酶A/B/C抗體Aurora A+B+C 0.2ml

磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體phospho-ALK (Tyr1278 + Tyr1282 + Tyr1283) 0.1ml

磷酸化ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體phospho-arfaptin 2 (Ser260) 0.1ml

磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體Phospho-Aurora B (Thr232) + Aurora C (Thr198) 0.1ml

磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體phospho-Acinus (Ser1180) 0.1ml

磷酸化腎上腺素能受體β2抗體phospho-ADRB2 (Ser346) 0.1ml

APS抗體APS 0.1ml

激活素受體樣激酶1抗體ACVRL1 0.2ml

激活素A受體1B抗體ACVR1B 0.2ml