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胚胎成纖維細胞使用及注意事項

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胚胎成纖維細胞介紹

胚胎干細胞(Embryonic Stem Cell,ESC)是由囊胚的內細胞團(InnerCellMass,ICM)分離培養的具有分化特性的細胞,具有長期自我增殖、自我更新和多向分化的潛能,能夠再生出各種功能細胞和組織器官。體外培養ESC的基本原則是在促進ESC增殖的同時,維持其未分化的二倍體狀態,保持其向三個胚層細胞分化的潛能。ESC體外培養主要采用飼養層培養法,目前使用Z普遍的飼養層細胞有小鼠胚胎成纖維細胞(Mouse Embryonic Fibroblast,MEF)及小鼠成纖維細胞無限系(STO)細胞。MEF作為飼養層培養ESC是一種Z常用的方法,它能有效地促進ESC的增殖并維持其未分化性和多潛能性,可用于大多數動物ESC的分離,大多數實驗室均采用該細胞。

細胞特性

1)來源:取13.5d、14.5d的孕鼠昆明小鼠或者C57BL/6小鼠

2)含量:>5x105個/mL

3)鑒定:Vimentin與Keratin蛋白免疫熒光染色法

4)純度:>85%

5)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

6)規格:1mL凍存管包裝

胚胎成纖維細胞運輸和保存: 1mL凍存管干冰運輸。

細胞使用:僅供科研使用。

細胞培養方法

1)*培養基:小鼠胚胎成纖維細胞培養基

2)培養方式:成纖維樣細胞,貼壁培養

注意事項:

1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。

2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。

3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.胚胎成纖維細胞所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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