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水稻胚乳原代細胞生物反應器的研究與應用

時間:2017-8-30閱讀:191
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原代細胞為了滿足日益增長的重組藥用蛋白質的市場需求,DNA重組技術已在許多宿主中得到應用。植物種子是經(jīng)濟重組藥物的一種具有吸引力的生物反應器。
楊教授及其團隊出了一種基于水稻種子的、具有成本效益的重組蛋白質平臺。水稻胚乳細胞表達技術平臺由重組蛋白質表達技術和下游加工工藝等兩部分關鍵技術組成,采用了水稻胚乳細胞特異性表達、在蛋白體中定向儲存和目的基因密碼子優(yōu)化等技術。
目前已成功表達各種重組蛋白如人乳鐵蛋白(80KD),人血清白蛋白(65KD),人抗胰蛋白酶(55KD)和人堿性成纖維細胞生長因子(17kD)。融合技術也在水稻種子平臺中被成功用來表達小分子多肽,如人胰島素樣生長因子(7kD)。所有表達的融合或非融合的蛋白質都已被證明了體內和體外的生物活性。此外,重組蛋白質的下游工藝,例如純度在99%以上的人血清白蛋白在這個平臺上可以很容易地開發(fā)和按比例放大。
通常,OsrHSA(植物源重組人血清白蛋白)可以作為無血清培養(yǎng)基添加物用于原代細胞培養(yǎng)當中,特別是用于培養(yǎng)干細胞,培養(yǎng)雜交瘤以產(chǎn)生單克隆抗體以及疫苗,或用作細胞冷凍保護劑。目前的數(shù)據(jù)表明,的重組蛋白質平臺,具有表達量高、成本低、遺傳穩(wěn)定性良好、工藝簡單、規(guī)?;菀缀途G色環(huán)保的特點。
ER0581    Nde I        500 units    
ER0542    Msp I        5x3000 units    
JN001-25G    Nicotinamide (VPP) 煙酰胺 (尼克酰胺)    98-92-0    25g    
M0375-500G    Maleic acid 馬來酸 (順丁稀二酸)    110-16-7    500g    
ER0432    Sca I        5000 units    
ER0402    Eco105 I        3000 units    
ER0361    Eco72 I        2000 units    
ER0312    Eco47 I        4000 units    
ER0281    Eco24 I        1500 units    
Worthington-5g    a-Amylase  α-淀粉酶    9000-92-4    5g    
C6885-100MG    CollagenaseⅡ 膠原酶Ⅱ    --    100mg    
C0130-100mg    CollagenaseⅠ 膠原酶Ⅰ    9001/12/1    100mg 
原代細胞  

 

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