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適用領域 | 科研 |
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Cas9穩定表達的人胃癌細胞;MKN-45-Cas9-526培養凍存過程:
將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml,加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中,用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜,次日保存到液氮中。
公司出售細胞培養、人細胞培養、小鼠細胞培養、大鼠細胞培養等動物細胞,幾乎能滿足多數客戶的實驗要求。公司是廣大顧客細胞購買理想的單位之一。細胞詳細參數如下:
1) 用途:提供用于科研的穩定細胞系
2) 包裝規格:25cm*cm(>1000000個細胞)
3) 保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
4) 細胞生長:貼壁生長
細胞名稱 Cas9穩定表達的人胃癌細胞;MKN-45-Cas9-526培養
形態特性 圓形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 建議初始濃度2.0×105 cells/ml,1:3傳代;4~5天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:12,12;D12S391:26,26;D13S317:8,11;D16S539:10,10;D18S51:16,16;D19S433:14,16.2;D21S11:31,31;D2S1338:18,18;D3S1358:15,16;D5S818:10,11;D6S1043:14,14;D7S820:10,11;D8S1179:13,17;FGA:19,24;Penta E:10,10;TH01:7,7;TPOX:8,8;vWA:19,19;
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩定表達的人胃癌細胞;MKN-45-Cas9-526培養細胞株培養的具體無菌技術要點:
1. 實驗開始前,無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘*滅菌,用70%擦拭無菌操作臺面,并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后,才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株,即使培養基*相同也不可共用培養基,以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后,請將實驗物品拿出工作臺,用70%再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應該讓無菌操作臺運轉10分鐘到15分鐘后,才能進行下一個細胞株的操作。
2. 無菌操作工作的區域應保持清潔和寬敞,必要物品(試管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暫時放置,其它實驗用品使用完畢后應移出,有利于空氣流通。實驗用品需70%擦拭后方可帶入無菌操作臺內。實驗操作過程應在臺面的中央無菌區域內完成,請勿在邊緣非無菌區域進行操作。
3. 小心取用無菌實驗物品,避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處,也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后,請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身,傾斜大約45°角取用,盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。
4. 工作人員應當首先注意自身安全,必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作,并選擇適當等級的無菌操作臺進行(至少是Class II)。操作過程中,應避免引起aerosol的產生,小心有毒性藥品,例如DMSO和TPA等,并避免針頭的傷害等等。
5. 定期檢測下列項目:
5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力
5.2. CO2培養箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染(水盤的水需用無菌水,每周定時更換)。
5.3. 無菌操作臺內的airflow壓力,定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜,預濾網(300小時/預濾網,3000小時/HEPA)。
6. 水槽內可添加消毒劑(Zephrin 1:750),需定期更換水槽中的水。
pET-24a(+)(pET24a)(60908-2789)y 原鈣粘蛋白γA8抗體
pET-24b(+)(pET24b)(60908-2788) 原鈣粘蛋白γA9抗體
pET-24c(+)(pET24c)(60908-2827) 原鈣粘蛋白γA11抗體
pET-24d(+)(pET24d) 原鈣粘蛋白γA12抗體
pET-25b(+)(pET25b)(60908-2790) 原鈣粘蛋白β12抗體
Cas9穩定表達的人胃癌細胞;MKN-45-Cas9-526培養pET-26b(+)(pET26b)(60908-2791) 原鈣粘蛋白β3抗體
pET-27b(+)(pET27b)(60908-2792) 原鈣粘蛋白γB1抗體
pET-28a(+)(pET28a) 原鈣粘蛋白γB2抗體
pET-28b(+)(pET28b)(60908-2819)y 原鈣粘蛋白γB4抗體
pET-28c(+)(pET28c) 原鈣粘蛋白γB6抗體
pET-29a(+)(pET29a)(60908-2794)y 原鈣粘蛋白γC3抗體
pET-29b(+)(pET29b) 原鈣粘蛋白γC4抗體
pET-29c(+)(pET29c) 磷酸蛋白聚糖PTPRZ抗體
pET-2a(pET2a) 神經特異蛋白酪氨酸磷酸酶N5抗體
pET-30a(+)(pET30a)(60908-2797)y 足細胞表達蛋白/轉錄因子21抗體
pET-30b(+)(pET30b) 孕激素受體抗體
pET-30c(+)(pET30c)(60908-2832) 神經細胞突觸蛋白PCLO抗體
pET-30Ek/LIC(pET30Ek/LIC)(60908-2795) 早老素γ分泌酶2抗體
pET-30Xa/LIC(pET30Xa/LIC)(60908-2796) 泛酸激酶1抗體
phospho-Fos B 蠶微粒子病PCR檢測試劑盒
phospho-FOXL2 倉鼠核因子kB受體活化因子配基(RANKL)ELISA Kit
Phospho-FoxO1 倉鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA Kit
Phospho-FoxO1 倉鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA Kit
Phospho-FoxO1 倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA Kit
Phospho-FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 產腸毒素性大腸桿菌PCR檢測試劑盒
phospho-FOXO1A 產毒副溶血弧菌PCR試劑盒
Phospho-FoxO3a 產氣莢膜梭菌C類磷脂酶基因(283bp)常規PCR檢測試劑盒
Phospho-FoxO3a 產氣莢膜梭菌PCR檢測試劑盒
Phospho-FoxO3a 腸產毒性E.coli核酸檢測試劑盒
phospho-FOXO4 腸道病毒EV70 PCR檢測試劑盒
phospho-FOXO4 腸道病毒EV71 PCR檢測試劑盒
phospho-FOXO4 腸道病毒EV71/柯薩奇病毒A16型2聯PCR檢測試劑盒
Phospho-FoxO4 腸道病毒PCR檢測試劑盒
Phospho-FRA1 腸道病毒通用型/EV71/柯薩奇病毒A16型3聯PCR檢測試劑盒
Phospho-FRAP1 腸道腺病毒40型PCR檢測試劑盒
phospho-FRS2 腸道腺病毒41型PCR檢測試劑盒
phospho-FSCN1 腸侵襲性E.coli核酸檢測試劑盒
phospho-FXYD1 腸致病性E.coli核酸檢測試劑盒
phospho-FXYD1 常見微生物培養基
phospho-G3BP1 常用PCR引物1 染色劑
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