公司向您推薦PrimaCell™小鼠神經小膠質細胞試劑盒說明書的詳細說明：

細胞株的培養和傳代培養：
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10％小牛血清和抗生素的培養液中，培養對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養，根據細胞生長特性，在適當的時候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代：
直接離心后吸去培養上清液，用新鮮培養液稀釋懸浮細胞，一般按1：2-1：5 稀釋細胞后，分瓶繼續培養。
?
實驗操作步驟：
a．采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養皿1個，細胞培養瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

冰凍切片免疫組織化學HRP酶聯DAB*間接檢測試劑盒（含一抗和HRP二抗） 進口/國產 規格：10次

小量LipofusinX脂質體細胞轉染試劑盒 進口/國產 規格：10次

超氧化物歧化酶（SOD）標準曲線測定試劑盒 進口/國產 規格：5次

肝素（heperin）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

植物氧化型谷胱甘肽（GSSG）濃度熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：50次

 PDGF-B蛋白表達西方雜交分析試劑盒 進口/國產 規格：5次

植物葡萄糖異構酶（phosphoglucose isomerase；GPI）活性光譜法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

 石蠟切片組織GSK-3BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產 規格：10/20次

組織PKCγ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） 進口/國產 規格：20次

純化RNA樣品儲存 進口/國產 規格：50毫升

組織游離脂肪酸酶連續循環比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：10次

GST釣餌（ PULL DOWN ）檢測試劑盒 進口/國產 規格：2/5次

PrimaCell™小鼠神經小膠質細胞試劑盒說明書4-溴-6-甲氧喹啉分子式：238.08英文名稱：4- bromide -6- a號：42881-66-3分子量： C10H8BrNO

1-BOC-3-分子式：200.28英文名稱：Aminopiperidine 1-BOC-3-號：144243-24-3分子量： C10H20N2O2

4-(3-溴)吡分子式：234.09英文名稱：4- (3-) pyridine號：4373-72-2分子量： C11H8BrN

麻醉椒苦素英文名稱：Anesthetic pepper分子式：274.27分子量：C15H14O5號：495-85-2

1,2,3-三氯丙烷英文名稱：1,2,3- three分子式：147.43分子量： C3H5Cl3號：96-18-4

東莨菪素英文名稱：Scopoletin分子式：192.168分子量：C10H8O4號：92-61-5

藏紅花英文名稱：Crocetin分子式：262.32分子量：C10H7KO4S號：30252-40-5

4-甲-3,5-二溴吡分子式：250.92英文名稱：4- methyl -3,5- dibromopyridine號：3430-23-7分子量： C6H5Br2N

4-羥-N-甲-2-喹啉分子式：175.18英文名稱：4- hydroxy -N- methyl -2-號：1677-46-9分子量： C10H9NO2

己酮可可堿英文名稱：Own ketone cocoa分子式：278.31分子量：C13H18N4O3號：1677687

2,5-二溴甲分子式：249.93英文名稱：2,5- dibromo toluene號：615-59-8分子量： C7H6Br2

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。