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服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人骨涎蛋白(BSP)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human bone sialoprotein (BSP) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11325 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
HER2受體抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:HER2 receptor(NT)
A型禽流感病毒H7N9 M1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:H7N9 Matrix Protein 1
人乙型肝炎核心抗原單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:HBcAg(1H8)
熱休克蛋白-22抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:HSP22
磷酸化組蛋白H1.4抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-Histone H1.4(Thr18)
葡萄糖氧化酶1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:HAO1
轉錄因子HES3抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:HES3
白介素-17D抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:IL-17D/IL-27
干擾素相關發(fā)育調節(jié)蛋白1抗體(神經(jīng)生長因子誘導蛋白PC4) 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:IFRD1
磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-IRS1(Ser789)
干擾素-γ/IFN-γ抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:IFN gamma
免疫球蛋白重鏈可變區(qū)抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:IgHV
整合素α6抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Integrin alpha 6
JNK相互作用蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:JLP
人骨涎蛋白(BSP)ELISA檢測試劑盒100mL TABS Buffer,0.2M,pH8.5 TABS Buffer,0.2M,pH8.5 常溫保存
100mL TABS Buffer,0.2M,pH9.0 TABS Buffer,0.2M,pH9.0 常溫保存
100mL TABS Buffer,0.2M,pH9.5 TABS Buffer,0.2M,pH9.5 常溫保存
1000mL TAE,50X TAE,50X 常溫保存
100mL TAPS Buffer,0.2M,pH8.0 TAPS Buffer,0.2M,pH8.0 常溫保存
100mL TAPS Buffer,0.2M,pH8.5 TAPS Buffer,0.2M,pH8.5 常溫保存
100mL TB Solution-I TB Solution-I 常溫保存
100mL TB Solution-II TB Solution-II 常溫保存
100mL TB Solution-III TB Solution-III 常溫保存
100mL TB Solution-IV TB Solution-IV 常溫保存
1000mL TBE Running Buffer,10X TBE Running Buffer,10X 常溫保存
25mL TBE Sample Buffer,6X TBE Sample Buffer,6X 常溫保存
10mL TBE Urea Sample Buffer,2X TBE Urea Sample Buffer,2X 常溫保存
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
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