操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

服務(wù)：
      我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。

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試劑配制
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

磷酸化蛋白激酶R抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：Phospho-PKR (Thr451)

磷酸化過氧化酶活化增生受體γ抗體 PPARγ 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：Phospho-PPAR Gamma (ser273)

蛋白激酶受體相關(guān)1β抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：PKA regulatory subunit I beta

磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：Phospho-PDPK1(Ser396)

前列干細(xì)胞抗原抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：PSCA

原鈣粘蛋白β3抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：PCDHB3

維生素D低磷性佝僂病蛋白 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：PHEX

蛋白Z抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：Protein Z

ATP酶鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMCA3抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：PMCA3

磷酸化苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：phospho-AMPK beta 1 (Ser182)

磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：phospho-c-Raf(Ser301)

維甲酸相關(guān)孤兒受體α抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：ROR alpha

視黃酸受體應(yīng)答蛋白3抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：Rarres3

Ras樣蛋白B抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：RALB

兔子Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA檢測試劑盒高車前苷;Homoplantaginin 17680-84-1 規(guī)格： 20mg

二氫石蒜堿;Dihydrolycorin 6271-21-2 規(guī)格： 20mg

多舌飛蓬苷;6’-O-Caffeoyle  規(guī)格： 20mg

膽維他;Anethole trithio 532-11-6 規(guī)格： 20mg

柴胡皂苷B1;Saikosaponin 58558-08-0 規(guī)格： 20mg

粗莖堿甲;Crassicauline 79592-91-9 規(guī)格： 20mg

;Benzaldehyde 100-52-7 規(guī)格： 0.5ml

白鮮堿;Dictamnine 484-29-7 規(guī)格： 20mg

艾黃素;Artemisetin 479-90-3 規(guī)格： 20mg

嘧霉胺;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品 53112-28-0 規(guī)格： 0.1g

吡氧乙酸;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品-使它隆; 69377-81-7 規(guī)格： 0.1g

異惡草松;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 81777-89-1 規(guī)格： 0.1g

草隆;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 42609-52-9 規(guī)格： 0.1g

戊菌唑;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 66246-88-6 規(guī)格： 0.1g