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公司向您推薦PrimaCell™大鼠骨骼肌衛星細胞試劑盒規格的詳細說明:
產品名稱 | PrimaCell™大鼠骨骼肌衛星細胞試劑盒規格 |
規格 | 6次/盒 |
貨號 | YS-X6769 |
細胞株的培養和傳代培養:
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10%小牛血清和抗生素的培養液中,培養對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養,根據細胞生長特性,在適當的時候進行傳代,一般3~4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代:
直接離心后吸去培養上清液,用新鮮培養液稀釋懸浮細胞,一般按1:2-1:5 稀釋細胞后,分瓶繼續培養。?
實驗操作步驟:
a.采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養皿1個,細胞培養瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
組織血管緊張素Ⅰ轉化酶1(ACE1)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
組織谷胱甘肽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
組織FGFR1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 進口/國產 規格:20次
細胞β-半糖苷酶原位染色試劑盒 進口/國產 規格:100次
血清/血漿游離脂肪酸酶連續循環比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:10次
細胞PTEN活性定磷比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
PA317包裝細胞克隆選擇培養基 進口/國產 規格:500毫升
載玻片細胞CDK3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產 規格:10/20次
酒類精氨酸(arginine)含量高效相色譜法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
載玻片細胞NF KAPPA B P50蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產 規格:10/20次
通用型雞敗血支原體(Mycoplasma;MG)基因檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
βAMYLOID蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 進口/國產 規格:5次
PrimaCell™大鼠骨骼肌衛星細胞試劑盒規格1,3-二-4-(5-溴-2-吡偶氮)分子式:262.10532英文名稱:1,3- (5- -2- two 4- amino bromine pyridine azo benzene)號:50768-75-7分子量: C11H8BrN3
吳茱萸次堿英文名稱:Wu Zhuyu base分子式:287.32分子量:C18H13N3O號:84-26-4
3-氟-N-氧吡分子式:113.09英文名稱:3- -N- oxidation號:695-37-4分子量: C5H4FNO
N-丙酰啡啉分子式:141.17英文名稱:N- acryloyl morpholine號:1175324分子量: C7H11NO2
乙嘧酚英文名稱:Ethirimol分子式:209.29分子量:C11H19N3O號:23947-60-6
1-甲-4-氯分子式:133.62英文名稱:1- methyl -4- chloro piperidine號:5570-77-4分子量: C6H12ClN
N-(羥甲)甲-2-乙磺英文名稱:N- (Qiang Jiaji) -2-分子式:229.25分子量: C6H15NO6S號:7365-44-8
2,4,5-三氟溴分子式:210.98英文名稱:2,4,5- three fluorine bromine號:327-52-6分子量: C6H2BrF3
6-羥喹啉分子式:145.16英文名稱:6- hydroxy group號:580-16-5分子量: C9H7NO
奎諾分子式:305.5英文名稱:Quinoform號:130-26-7分子量: C9H5ClINO
仲丁氯鎂英文名稱:Zhong Dingji magnesium chloride分子式:116.873分子量: C4H9ClMg號:15366-08-2
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
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