公司向您推薦PrimaCell™小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞試劑盒說明書的詳細(xì)說明：

細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長特性，在適當(dāng)?shù)臅r候進(jìn)行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細(xì)胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細(xì)胞，一般按1：2-1：5 稀釋細(xì)胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實(shí)驗(yàn)操作步驟：
a．采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實(shí)驗(yàn)材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

組織糖原化酶b（GLYCOGEN PHOSPHORYLASE）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10次

組織精氨酸（arginine）含量高效相色譜法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

二苯基甲（diphenylformamide） 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：25毫克

 細(xì)胞EGFR 蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/50 次

GMS10甲基化基因鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10X100微升

細(xì)胞CK2α激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織糖原合成酶（GLYCOGEN synthase）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織可溶性總核蛋白制備試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

通用型非變性裂解 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：適合各種細(xì)胞native蛋白

通用型乙酰膽堿酯酶活性熒光法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

小鼠PR基因甲基化檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

裂解Ⅵ 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：線粒體裂解

PrimaCell™小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞試劑盒說明書2-(4-氯甲)吡分子式：203.67英文名稱：2- (4-) pyridine號：4350-41-8分子量： C12H10ClN

硝腐植鉀英文名稱：Potassium nitro humic acid分子式：分子量：號：

3-乙吡分子式：121.14英文名稱：3- ethyl pyridine號：350-03-8分子量： C7H7NO

1,3-二溴-5-分子式：361.8英文名稱：1,3- dibromo -5- 4-iodo號：19752-57-9分子量： C6H3Br2I

溴1-十二烷-3-甲咪唑分子式：331.33英文名稱：1- twelve alkyl -3-號：分子量： C16H31BrN2

5-(三正丁錫)嘧分子式：369.13英文名稱：5- (tributylstannyl) pyrimidine號：144173-85-3分子量： C16H30N2Sn

2-溴-5-甲-1,3,4-噻二唑分子式：英文名稱：2- methyl -1,3,4- two號：54044-79-0分子量： C3H3BrN2S

辛可寧英文名稱：Xin Kening分子式：294.39分子量：C19H22N2O號：118-10-5

補(bǔ)骨脂二氫黃酮英文名稱：Psoralen two flavanones分子式：分子量：號：

石杉堿丙英文名稱：Isugi分子式：242.3202分子量：C15H18N2O號：

鉭試劑(BPHA)英文名稱：Tantalum reagent (BPHA)分子式：213.23分子量： C13H11NO2號：304-88-1

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。