培養細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

?

細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
培養操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。      
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

等位基因特異性表達分析試劑盒 進口/國產 規格：5次

轉基因玉米T25品系基因檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒 進口/國產 規格：20次

石蠟切片中性脂質尼羅紅間接染色試劑盒  進口/國產 規格：10次

冰凍切片氧化應激活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（次氯酸離子） 進口/國產 規格：20次

動物腮腺組織細胞分離培養試劑盒 進口/國產 規格：10次

石蠟切片組織CDK4蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產 規格：10/20次

組織對氧磷酶3（PON3）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：

 細胞RHO 蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒 進口/國產 規格：10/20次

水解活力（AMINOLYTIC）檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

HIS（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） 進口/國產 規格：100微升

動物組織氫/鉀ATP酶（H＋/K＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

PrimaCell™小鼠角膜成纖維細胞試劑盒規格2-氟-5-氯三氟分子式：英文名稱：2- -5- three - chlorine fluoride號：3455分子量：

3,4,5-*氧甲分子式：182.22英文名稱：3,4,5- grade three oxygen radical號：6443-69-2分子量： C10H14O3

對六聯分子式：458.6英文名稱：To six號：4499-83-6分子量： C36H26

2-甲并噻唑分子式：149.21英文名稱：2- Methylbenzothiazole號：120-75-2分子量： C8H7NS

乙氧氟草英文名稱：Ethylene oxide.分子式：361.7分子量： C15H11ClF3NO4號：42874-03-3

2-氯-5-硝三氟甲分子式：225.55英文名稱：2- -5- nitro three號：777-37-7分子量： C7H3ClF3NO2

2,3,5-三氟溴分子式：210.98英文名稱：2,3,5- three fluorine bromine號：133739-70-5分子量： C6H2BrF3

3-甲酰-1-甲氯吡分子式：172.61英文名稱：3- -1- methyl chloride號：1005-24-9分子量： C7H9ClN2O

順磺阿曲庫銨英文名稱：The ammonium salt of the library分子式：1243.48分子量：號：96946-42-8

4-(2-THIENYL)BUT-3-EN-2-ONE英文名稱：4- (2-THIENYL) BUT-3-EN-2-ONE分子式：152.21分子量： C8H8OS號：99768-07-7

水醛英文名稱：Water Yang aldehyde分子式：122.12分子量： C7H6O2號：32912