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操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rat thyroglobulin (TG) ELISA Kit |
貨號 | YS-R11909 |
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試劑配制
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
葒草苷;Orientin 28608-75-5 訂購|咨詢 規格: 20mg
根薯內酯B;Taccalolide 108885-69-4 訂購|咨詢 規格: 20mg
葛根素;Puerarin 3681-99-0 訂購|咨詢 規格: 20mg
5,7-二羥基色原;5,7-dihyd 31721-94-5 訂購|咨詢 規格: 10mg
德爾塔林 ; deltaline 訂購|咨詢 規格: 20mg
地榆皂苷Ⅰ;Ziyu-glycoside 35286-58-9 訂購|咨詢 規格: 20mg
長春瑞濱;Virelbine 71486-22-1 訂購|咨詢 規格: 20mg
常春藤皂苷元;Hederagenin 465-99-6 訂購|咨詢 規格: 20mg
7-表紫杉醇;7-Epitaxol 105454-04-4 訂購|咨詢 規格: 20mg
貝母辛;peimisine 19773-24-1 訂購|咨詢 規格: 20mg
桉油精;Cineole 訂購|咨詢 規格: 0.1ml
乙羧草;純品型;標準品;有證書 77501-60-1 訂購|咨詢 規格: 0.25g
草靈;純品型;標準品;有證書 1918-18-9 訂購|咨詢 規格: 0.1g
唑草;純品型;標準品;有證書-(唑草 128639-02-1 訂購|咨詢 規格: 0.1g
錫;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 規格: 0.1g
大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA檢測試劑盒FC33(人胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾))Tris-Glycine SDS
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
玫煙色擬青霉玉米孢霉
人腺成纖維細胞*培養基枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
HGC-27人胃細胞HCC1937(人腺細胞)
鼠桿菌 Lactobacillus murinus酸球菌霍氏亞種 Lactococcus lactis subsp. hordniae
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
MLTC-1(小鼠睪間質細胞瘤細胞)SCaBER(人膀胱鱗細胞)
泡盛曲霉 Aspergillus awamori戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
HeLa/宮頸細胞蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種 Bacillus thuringeinsis subsp. thuringeinsis
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae膠原酶(含100mL酶解緩沖液)
球孢白僵菌 Beauveria bassiana泡盛曲霉 Aspergillus awamori
大鼠氣管上皮細胞*培養基百脈根根瘤菌 Rhizobium loti
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactisOne Step Western Kit HRP (Rabbit)/一步法快速WB(HRP)試劑盒(兔)
木霉少根根霉 Rhizopus arrhizus
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