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試劑配制
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 人補體7(C7)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human complement 7 (C7) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11089 |
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
磷酸化Bax抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:phospho-Bax (Thr167)
腦環核苷酸門控通道蛋白1抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:BCNG1
磷酸化淋巴細胞衍生C-型凝集素抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:phospho-C-REL (Ser503)
7號染色體開放閱讀框65抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:C7orf65
細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2B抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:CDKN2B
染色質修飾蛋白1B抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:CHMP1B
鈣離子通道a1F亞型抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:CACNA1F
周期素B1抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:Cyclin B1
8號染色體開放閱讀框55抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:C8orf55
7號染色體開放閱讀框59抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:C7orf59
3號染色體開放閱讀框62抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:C3ORF62
磷酸化后期促進復合蛋白3抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:phospho-CDC27 (Thr244)
α1-chimaerin蛋白抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:Alpha chimerin
補體C1qTNF8鏈多肽抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:C1QTNF8
人補體7(C7)ELISA檢測試劑盒1kg 變色硅膠 Silica Gel 室溫干燥保存
25g 硝酸銀 Silver Nitrate 室溫干燥避光保存
1g 芥子酸 Sinapic Acid 室溫干燥保存
10Ku 超氧化物歧化酶 SOD -20℃保存
25g 疊氮鈉 Sodium Azide 常溫保存
100g 鈉 Sodium Chloride 密封保存
100g 檸檬酸鈉,二水 Sodium Citrate Dihydrate 室溫保存
5g Sodium Cyanoborohydride 室溫陰涼干燥保存
25g 氟化鈉 Sodium Fluoride 室溫保存
25g 十二烷基肌氨酸鈉 Sodium Lauroylsarcosine 室溫保存
25g 偏釩酸鈉 Sodium Metavanadate 室溫保存
25g 原釩酸鈉,十二水 Sodium Orthovanadate Dodecahydrate 室溫密封保存
25g 琥珀酸鈉,六水 Sodium Succinic Hexahydrate 室溫保存
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
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