實驗操作步驟：
a．采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

公司向您推薦PrimaCell™大鼠結腸平滑肌細胞試劑盒說明書的詳細說明：

細胞株的培養和傳代培養：
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10％小牛血清和抗生素的培養液中，培養對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養，根據細胞生長特性，在適當的時候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代：
直接離心后吸去培養上清液，用新鮮培養液稀釋懸浮細胞，一般按1：2-1：5 稀釋細胞后，分瓶繼續培養。
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實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養皿1個，細胞培養瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

體肌酸激酶（CK）總活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：25次

CYP2B1蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：25次

細菌腺苷酸激酶（Adenylate kinase）活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

 組蛋白H3-K27乙酰化檢測試劑盒 進口/國產 規格：10/20次等

血脯氨酰肽酶（prolinase）比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

  蛋白表達西方雜交分析試劑盒-LEPTIN 進口/國產 規格：5次

細菌抗生素（青霉素）敏感性DISC彌散（KIRBY-BAUER）檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

體D-葡萄糖氧化法定量檢測試劑盒  進口/國產 規格：20次

細胞色素P450亞酶CYP2C（AMD）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

血過氧化氫酶（CATALASE）過氧化活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

 CYTOCHROME C蛋白表達西方雜交分析試劑盒 進口/國產 規格：5次

動物組織細胞色素P450酶體系濃度定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

PrimaCell™大鼠結腸平滑肌細胞試劑盒說明書2,4-二磺酰二氯均*分子式：317.2英文名稱：2,4- two chloride two chloride three號：68985-08-0分子量： C9H10Cl2O4S2

N-氨丙啡啉分子式：144.21英文名稱：N- aminopropyl morpholine號：123-00-2分子量： C7H16N2O

四亞甲亞砜分子式：104.17英文名稱：Methylene four號：1600-44-8分子量： C4H8OS

4,6-二甲-2-巰嘧分子式：140.21英文名稱：4,6- two methyl -2-號：22325-27-5分子量： C6H8N2S

1-[2-(三氟甲)]咪唑分子式：212.18英文名稱：1-[2- (three f) phenyl]號：25371-96-4分子量： C10H7F3N2

2,5-二氯吡分子式：147.99英文名稱：2,5- two號：16110-09-1分子量： C5H3Cl2N

乙酸分子式：150.18英文名稱：Phenyl acetic acid號：937-39-3分子量： C8H10N2O

1,3,6,8-四硝咔唑分子式：347.2英文名稱：1,3,6,8- four nitro carbazole號：4543-33-3分子量： C12H5N5O8

氧萎銹靈英文名稱：Oxycarboxin分子式：267.3分子量：C12H13NO4S號：5259-88-1

5-丁-并三唑分子式：175.23英文名稱：5- butyl benzene and three號：3663-24-9分子量： C10H13N3

烏堿英文名稱：Aconitine分子式：645.73708分子量：C34H47號：302-27-2

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。