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沙門氏菌檢測試劑盒(熒光PCR法)

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具體成交價以合同協議為準

產品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-11-20 20:22:14瀏覽次數:109次

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規格 50次 貨號 YS-P013893
品牌 YSRIBIO
沙門氏菌檢測試劑盒(熒光PCR法)原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。

QQ截圖20191211135002.jpg
服務流程:

公司產品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱

規格

貨號

沙門氏菌檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

YS-P013893

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

PCR反應的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

豚鼠β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)紫杉C神經突起生長誘導因子受體Unc5a抗體

豚鼠斑型POZ蛋白(SPOP)2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-羥-7-差向-紫衫二磷酸葡萄糖神經酰葡萄糖轉移酶2抗體

豚鼠白介素24 (IL-24)N-Debenzoyl-7-{[(2,2,2,-trichloroethyl)oxy]carbonyl}紫杉尿酸酶

豚鼠狀腺球蛋白(TG)6α,3'-對二羥紫杉尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶抗體

豚鼠Rac-GTP酶激活蛋白1(Rac-GAP1)7-差向 10-去酰紫衫荊豆凝集素1抗體

豚鼠分泌性白蛋白酶抑制因子(SLPI)(S,S)-帕洛諾司瓊鹽酸鹽-d4尿路上皮特異蛋白3抗體

豚鼠水通道蛋白3(AQP-3) N-氧帕洛諾司瓊尿路上皮特異蛋白1a抗體

豚鼠周期素依賴性激酶5(CDK5) 帕珠沙星去泛素酶16抗體

豚鼠質金屬蛋白酶3(MMP-3) 培美曲塞二鈉整合素結合性信號分子抗體

豚鼠胸腺質淋巴生成素(TSLP)培美曲塞二鈉-d5磷酸化自噬相關蛋白1抗體

豚鼠抗生長激素抗體(GHAb) 培美曲塞-15N,13C5堿性成纖維生長因子受體1抗體

豚鼠核孔蛋白153kda(NUP153)磺噻唑鈉鹽珠蛋白抗體

豚鼠葡萄糖轉運蛋白2(GLUT2)匹格列酮-d4尿皮質素抗體

豚鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)羥匹格列酮(M-Ⅶ)泛素結合酶7相互作用蛋白5抗體

豚鼠信號素3B (SEMA3B) 5-去5-羧匹格列酮泛素特異性蛋白酶1抗體

豚鼠不均一核糖核蛋白A2/B1 (HNRPA2B1)酮匹格列酮(M-Ⅲ)線粒體脫偶連蛋白1抗體
沙門氏菌檢測試劑盒(熒光PCR法)PAX1/FITC  熒光素標記配對盒因1抗體IgG氯代異烷 CP,97%

PAX2/FITC  熒光素標記配對盒因2抗體IgG溴代烷 99%

RACK1/FITC  熒光素標記受體激活蛋白激酶C1抗體IgG2,5-二溴 98%

PAX3/FITC  熒光素標記配對盒因3抗體IgG二溴氯烷 分析標準品

PAX5/FITC  熒光素標記配對盒因5抗體IgG二溴氯烷 98%

PAX7/FITC  熒光素標記配對盒因7抗體IgG1,10-二溴癸烷 95%

PAX8/FITC  熒光素標記配對盒因8抗體IgG對二溴 97%

PAX9/FITC  熒光素標記配對盒因9抗體IgG對二溴 99%

 


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