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服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human hepatitis IgM (HCV-IgM) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11083 |
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試劑配制
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
MSH2抗原 0.5mgMSH2 (mutS homolog 2)
鋅指脂蛋白-1b(抗原) 0.5mgZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1b)
表皮生長因子多肽 0.5mgEGF(Epidermal growth factor)rat
神經元特異性烯醇化酶抗原 0.5mgNSE
熒光素標記馬IgG 0.3mlHorse IgG/FITC
熒光素PE標記牛IgM 0.1mlBovine IgM/PE
熒光素Cy3標記小鼠IgM 0.1mlMouse IgM/Cy3
熒光素標記兔抗FITC 0.3mlRb Anti-FITC/FITC
人胸腎表達趨化因子 96TBRAK/CXCL14(Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK) ELISA Kit
胰癌相關抗原 96TCA199
肺炎支原體 IgM(間接法二步法)MP IgM
人內質網應激相關蛋白CHOP 96Thuman CHOP ELISA Kit
大豆凝集素 96TSoybean agglutinin,SBA ELISA Kit
小鼠腦源性神經營養因子 96TBDNF(Mouse Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit
人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA檢測試劑盒1g 苯 Phenylmethyl Sulfonyl Fluoride(PMSF) 室溫保存
100mg 6- 磷酸葡萄糖鋇鹽 6-Phosphogluconic Acid Barium salt Hydrate 室溫干燥避光保存
100g 植物凝膠 Phytagel (Gellan Gun) 室溫保存
10g 植酸鈉 Phytic Acid Sodium Salt Hydrate 室溫陰涼保存
25g 豬膽鹽 Pig Bile Salts 室溫保存
10g 1,4- 二乙磺酸 1,4-Piperazinediethane Sulfonic Acid (PIPES) 室溫干燥保存
100mL 聚乙烯亞胺 Poly(Ethyleneimine) Solution 室溫保存
25mL 聚乙二醇溶液 Poly(Ethylene Glycol Solution) 4℃保存
1g 多聚半乳糖醛酸鈉鹽 Polygalacturonic Acid Sodium Salt 室溫保存
25mg 多聚 -L- 賴氨酸 (15-30 萬 ) Poly-L-Lysine -20℃保存
25mg 多聚 -L- 賴氨酸 (3-7 萬 ) Poly-L-Lysine -20℃保存
25mg 多聚 -L- 賴氨酸 (7-15 萬 ) Poly-L-Lysine -20℃保存
100mg 多粘菌素 B 硫酸鹽 Polymyxin B Sulfate 4℃保存
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
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