培養細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

 產品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩定。在技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。科技提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、科技售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

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細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
培養操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。      
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

卵磷脂-吐溫 80 營養瓊脂培養基基礎TTC 卵磷脂-吐溫 80 營養瓊脂培養基基礎梓醇 ≥97% (HPLC)腦心浸液肉湯pUNO1-hCCL23

無菌 0.5%TTC 溶液β-胡蘿卜素 96%莫匹羅星鋰鹽改良MRS培養基pUNO1-hCCL26

雙倍乳糖膽鹽含中和劑培養基基礎姜黃素 AR革蘭氏染色液pUNO1-hCCL28a

吐溫-80姜黃素 98%Voges-Proskauer(V-P)試劑盒pUNO1-hCCR1

伊紅美藍瓊脂EMB姜黃素 分析標準品細菌蛋白胨pUNO1-hCCR10

培養基班蝥素 98%明膠磷酸鹽緩沖液pUNO1-hCCR2mb

伊紅美藍瓊脂平板班蝥素 分析標準品，≥98%ModifiedSclohtens'Broth(MSB)pUNO1-hCCR3a

蛋白胨水輔酶Q10 98%含1%棉籽糖的PY培養基pUNO1-hCCR4

Kovacs 氏靛基質試劑喜樹堿 97%PPLO瓊脂pUNO1-hCCR5

革蘭氏染色液葉綠素b 95%葡萄糖肉湯pUNO1-hCCR6

大鼠氣管和支氣管上皮細胞規格p, p’-DDE 分析標準品DNA退火緩沖液（5X）黃楊木提取物（漆黃素）Mouse PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit

Mouse FABPL(Fatty acid-binding protein) ELISA Kit

p, p’-DDE標準溶液99.2mg/L,溶劑:異辛烷酸性醇分化液(1%) β-煙酰胺單核苷酸Mouse Fabp4(Fatty acid-binding protein, adipocyte) ELISA Kit

Mouse Fads3(Fatty acid desaturase 3) ELISA Kit

p, p’-DDE標準溶液100μg/ml，溶劑：醇三磷酸腺苷溶液(ATP,10mmol/L) 莫匹羅星鈣Mouse Fads2(Fatty acid desaturase 2) ELISA Kit

Mouse MAP1LC3A(Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3A) ELISA Kit

p, p’-DDE標準溶液100μg/ml,u=3%,溶劑:石油醚Adenine 腺嘌呤戊酸雌二醇Mouse His(Histamine) ELISA Kit

Mouse SIRT2(Sirtuin 2) ELISA Kit

p, p’-DDE標準溶液10μg/ml,u=3%,溶劑:石油醚L-Alanine L-氨酸根皮素Mouse MYH7B(Myosin heavy chain 7) ELISA Kit

Mouse Tnnt3(Troponin T, fast skeletal muscle) ELISA Kit

p, p’-DDT標準溶液100μg/ml,溶劑：醇96孔PCR硅膠封板膜  '96孔PCR硅膠密封蓋,10 塊 /包, 5 包 / 箱十二烷基二基氧化胺Mouse CMLC-1(Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit

Mouse NMNAT1(NMN adenylyl transferase 1) ELISA Kit

p, p’-DDT標準溶液100μg/ml,u=3%,溶劑:石油醚PVDF膜（0.22um）去膽酸Mouse FOXO3(Forkhead box protein O3) ELISA Kit

Mouse M-CSF(Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA Kit

p, p’-DDT標準溶液10μg/ml,u=4%,溶劑:石油醚Nisin  乳酸鏈球菌肽月桂醇聚醚-4Mouse PCT(Procalcitonin) ELISA Kit

Mouse LGR-5(leucine-rich repeat-containing g-protein coupled receptor 5) ELISA Kit

p, p’-DDD標準溶液100μg/ml,溶劑：醇Cefsulodin Sodium Salt Hydrate 頭孢磺吡芐鈉鹽水合物一氧化硅Mouse Dclk1(Serine/threonine-protein kinase DCLK1) ELISA Kit

Mouse MSI-1(RNA-binding protein Musashi homolog 1) ELISA Kit

p, p’-DDD標準溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:石油醚Daunorubicin HCl 鹽酸柔紅霉素大蒜素Mouse BMI-1(Polycomb complex protein BMI-1) ELISA Kit

Mouse Notch-1(Neurogenic locus notch homolog protein 1) ELISA Kit