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操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 人丙二醛(MDA)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Malondialdehyde (MDA) ELISA Kit |
貨號 | YS-M11078 |
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試劑配制
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
超氧化物歧化酶4抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:SOD4
微管蛋白α/Tubulin α抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:Tubulin-alpha 1
睪特異激酶2抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:TESK2
酮基移換酶樣蛋白1抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:TKTL1
磷酸化酪氨酸激酶A抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-TrkA(Tyr496) +TrkB(Tyr516)
增生蛋白1抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:TMEFF2
轉錄增強因子TEF3抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:TEF3
磷酸化微管相關蛋白抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:phospho-Tau protein(Ser721)
TEX261蛋白抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:TEX261
尿皮質素UCN3抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:Urocortin 3
泛素蛋白連接酶U抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:UBE2U
磷酸化鳥苷酸轉換因子VAV1抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:phospho-VAV1 (Tyr174)
囊泡相關膜蛋白相關的蛋白B 規格: 0.2ml 英文名稱:VAPB
心肌缺血預處理正調節蛋白2抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:WDR26
人丙二醛(MDA)ELISA檢測試劑盒25mg 萘酚 AS-TR 磷酸鹽 Naphthol AS-TR Phosphate Disodium Salt -20℃保存
5g 氨基黑 10B Naphthol Blue Black 室溫保存
5g 乙酸- 1 -萘脂 1-Naphthyl Acetate 室溫保存
5g 1- 萘胺 1-Naphthylamine -20℃保存
500mg 硝基四氮唑蘭 NBT (Nitroblue Tetrazolium Chloride) -20℃保存
10g 硫酸新霉素 Neomycin Trisulfate Salt Hydrate 室溫保存
5g 中性紅 Neutral Red 室溫保存
25g 煙酰胺 Nicotinamide 室溫干燥保存
25g 煙酸 Nicotinic Acid 室溫避光保存
500mg 硝苯吡啶 Nifedipine 4℃保存
10g 茚三酮 Ninhydrin 室溫避光保存
1g 對硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷 p-Nitrophenyl-β-D-Galacto-Pyranoside(PNPG) -20℃保存
1g 鄰硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷 o-Nitrophenyl-β-D-Galacto-Pyranoside(ONPG) -20℃保存
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