T4 DNA連接酶實驗方法〖英文名稱〗：T4 DNA Ligase

〖號〗：9015-85-4

分子量：55.3kDa，單體

〖級別〗：BR

來源：含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌

活性定義：是指在ATP-PPi交換反應中，37℃、30分鐘內將1nmol [32PPi]轉換為Norit可吸收形式所需的酶量（weiss單位，1個weiss單位相當于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位：20ul反應體系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分鐘內連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產物所需的酶量） 

抑制劑：當反應體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時，可強烈抑制T4 DNA Ligase活性

失活：65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘

注意：T4 DNA Ligase與DNA結合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率，為避免此現象，電泳前需處理樣本或分子量標準。樣本處理如下：樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴〖保存〗；轉化時，連接產物的體積不得超過感受態細胞體積中的10%；電轉化之前，先用氯方抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase，然后經乙醇沉淀純化抽提產物

質量控制：測試表明無內切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測：粘性末端或平末端DNA的連接能力

〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，還可以修復雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復合體中的單鏈切口，連接DNA的粘性和平末端，但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP

〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接；雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接；雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復合體中缺口的修復；連接酶介導的RNA檢測；位點特異性突變；擴增片段長度多態性

〖保存〗： -20°C

公司產品經無數次市場驗證，若出現非人為操作實驗出不了結果或產品質量問題可無條件換貨或退貨。歡迎各位新老客戶惠顧！

T4 DNA連接酶實驗方法儲存條件：
避光、干燥陰涼處封閉貯存,嚴禁與有毒、有害物品混放、混運。本品為非危險 產品可按一般化學品運輸,輕搬動輕放,防止日曬、雨淋！受熱、受潮、受光后易喪失活力,保存期短,因此貯存和運輸條件比較苛刻。
主營業務：盒、細胞凋亡檢測試劑盒、分子生物學試劑盒。
生化試劑：*生化試劑、進口
試劑盒：酶聯免疫試劑盒、免疫印跡試劑盒、免疫組化試劑原裝生化試劑、國產生化試劑。
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