細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。科技提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、科技售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用.

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培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

無菌采樣袋/均質(zhì)袋對(duì)氨基酚 CP，98%BBL液體培養(yǎng)基pUNO1-hFGFR2

Bolton 增菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)含化血紅素對(duì)氨基酚 99% (HPLC)MPC瓊脂培養(yǎng)基pUNO1-hFGFR4

Bolton 增菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加劑對(duì)氨基酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%瓊脂培養(yǎng)基F(紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂)pUNO1-hFIP200

無菌脫纖維綿羊血鄰 CP,98%腸道菌富集肉湯培養(yǎng)基（USP）pUNO1-hFLII

無菌 Bolton 增菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)含化血紅素基香蘭素 98%馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂pUNO1-hFLK1(mb)

培養(yǎng)基4-基愈創(chuàng)木酚 99%沙氏葡萄糖瓊脂（USP）pUNO1-hFLK1(s7)

細(xì)菌學(xué)蛋白胨對(duì)酚 AR改良甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)pUNO1-hFLT1(s7)

改良 CCDA 培養(yǎng)基基礎(chǔ)香草醛 AR，99%Todd-Hewitt瓊脂pUNO1-hFLT3LG

改良 CCDA 培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加劑叔基對(duì)苯二酚 98%梭菌強(qiáng)化培養(yǎng)基pUNO1-hFLT4(s7)

Skirrow 瓊脂基礎(chǔ)2,5-二叔基對(duì)苯二酚 98%酸化MRS瓊脂（AMRSA）pUNO1-hFOS

大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞說明書醇中揮發(fā)性鹵代烴混合標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Tiamulin 泰妙菌素牛奶布粉Porcine NOS3/eNOS(Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial) ELISA Kit

Porcine NPY(Neuropeptide Y) ELISA Kit

醇中揮發(fā)性鹵代烴混合標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Tiamulin 泰妙菌素芒果布粉Porcine NT-3(Neurotrophin-3) ELISA Kit

Porcine Ntn1(Netrin 1) ELISA Kit

醇中揮發(fā)性有機(jī)物混合標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品 Timentin 特美汀（新型革蘭氏陰性菌抗生素）香草奶昔粉Porcine NT-ProBNP(N-Terminal Pro-Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit

Porcine OC/BGP(Osteocalcin/Bone Gla Protein) ELISA Kit

水質(zhì)總堿度標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Tunicamycin 衣倍他司汀Porcine OPG(Osteoprotegerin) ELISA Kit

Porcine OPN(Osteopontin) ELISA Kit

水質(zhì)濁度標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Tylosin 泰樂菌素替卡格雷中間體Porcine PAF(Plaet Activating Factor) ELISA Kit

Porcine PAI1(Plasminogen Activator Inhibitor 1) ELISA Kit

對(duì)二苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：二硫化碳Tylosin 泰樂菌素香醛Porcine PDGFB(Plaet Derived Growth Factor Subunit B) ELISA Kit

Porcine PEDF(Pigment Epithelium Derived Factor) ELISA Kit

對(duì)二苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：醇 Vancomycin 鹽酸萬古  Amresco葉黃素酯Porcine Pg(Progesterone) ELISA Kit

Porcine PP(Pepsin) ELISA Kit

對(duì)二苯標(biāo)準(zhǔn)溶液1mg/ml,溶劑:醇Vancomycin 鹽酸萬古  Amresco替莫唑胺Porcine PRL(Prolactin) ELISA Kit

Porcine RETN(Resistin) ELISA Kit

間二苯標(biāo)準(zhǔn)溶液1mg/ml,溶劑:醇,水質(zhì)分析WortMannin 渥曼青脫氧熊果苷Porcine S100A11(S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit

Porcine S100A6(S100 Calcium Binding Protein A6) ELISA Kit

鄰二苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品WortMannin 渥曼青維生素K2Porcine sCD14(Soluble Cluster of Differentiation14) ELISA Kit

Porcine SCF(Stem Cell Factor) ELISA Kit
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。