實驗操作步驟：
a．采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

公司向您推薦PrimaCell™大鼠胰腺星狀細胞試劑盒的詳細說明：

細胞株的培養和傳代培養：
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10％小牛血清和抗生素的培養液中，培養對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養，根據細胞生長特性，在適當的時候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代：
直接離心后吸去培養上清液，用新鮮培養液稀釋懸浮細胞，一般按1：2-1：5 稀釋細胞后，分瓶繼續培養。
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實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養皿1個，細胞培養瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

 細胞MYC蛋白表達熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：10/50 次

大麥β-淀粉酶活性PNPG5酶偶聯比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

 PASE-4蛋白表達西方雜交分析試劑盒 進口/國產 規格：5次

 PASE-10蛋白表達西方雜交分析試劑盒 進口/國產 規格：5次

3′端DNA生物素轉移酶標記鑒定試劑盒 進口/國產 規格：10次

酵母NADPH氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次（10樣本）

甲醛RNA電泳上樣緩沖（RNA酶保護） 進口/國產 規格：10毫升

細胞氨含量熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

血栓溶解活力（THROMBOLYTIC）體外檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

PASE-8蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：25次

血谷氨酸酸轉氨酶（GPT）活性光譜法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

細胞二胺氧化酶（DAO）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

PrimaCell™大鼠胰腺星狀細胞試劑盒鈷粉/鈷片分子式：58.93英文名稱：Cobalt powder / cobalt film號：7440-48-4分子量： Co

色素(水溶)英文名稱：Melanin (Shui Rong)分子式：分子量：號：2229872

堿性品藍英文名稱：Basic blue分子式：分子量：號：

(鈀試劑)4-(8-羥-5-喹啉偶氮)萘磺英文名稱：(palladium reagent) 4- (8- hydroxy -5-) naphthalene sulfonic acid分子式：379.39分子量： C19H13N3O4S號：26644-96-2

醋環丙氯地孕酮英文名稱：Acetic acid and chloride分子式：416.94分子量： C24H29ClO4號：427-51-0

2--3,5-二溴-6-甲吡分子式：265.94英文名稱：2- amino -3,5- dibromo -6- methyl pyridine號：91872-10-5分子量： C6H6Br2N2

巴馬汀英文名稱：Martin分子式：352.4分子量：C21H22NO4+號：3486-67-7

丁氫可的松英文名稱：Hydrocortisone butyrate分子式：432.55分子量： C25H36O6號：13609-67-1

派派分子式：149.131英文名稱：Group of radicals號：4897-50-1分子量： C10N2H

N-芐-4--4-(1-)-分子式：283.4英文名稱：N- benzyl -4- cyano -4- (1- 4-piperidyl) - piperidine號：84254-97-7分子量： C18H25N3

4,4'-雙(氯甲)-2,2'-聯吡分子式：253.13英文名稱：4,4'- bis (CL) -2,2'-號：138219-98-4分子量： C12H10Cl2N2

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。