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操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 人抗核因子抗體(ANF)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human anti nuclear factor antibody (ANF) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11530 |
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試劑配制
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
磷脂酰肌醇激酶(抗原) 0.5mgPI3K
酪氨酸羥化酶(抗原) 0.5mgTY3H ( Tyrosine Hydroxylase )
細胞周期調控因子34抗原 0.5mgCdc34 peptide
富半胱氨酸肝素結合蛋白61抗原 0.5mgCyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61)
磷酸化粘著斑激酶抗原 0.5mgphospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase)
c-erbB-2受體抗原(N端) 0.5mgHER2 receptor(NT)(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus)
整合素α3抗原 0.5mgIntegrin Alpha3
基質金屬蛋白酶-26抗原 0.5mgMMP-26(Matrix metalloproteinase-26)
p70S6Kb抗原 0.5mgp70 S6 Kinase/P70 Beta1
臂板蛋白3A(多肽) 0.5mgSema3A (semaphorin 3A)
睪激素受體相關蛋白/孤兒素受體相關蛋白(抗原) 0.5mgTRA16 (Testicular orphan nuclear receptor-4 (TR4)-associated protein)
B 和 T 淋巴細胞衰減蛋白(抗原) 0.5mgCD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator)
瘦素(抗原) 0.5mgLeptin
非受體型酪氨酸激酶(抗原) 0.5mgSYK (Spleen tyrosine kinase)
人抗核因子抗體(ANF)ELISA檢測試劑盒小鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒 英文名: HL ELISA Kit
小鼠肝臟型脂肪酸結合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒 英文名: L-FABP ELISA Kit
小鼠肝細胞生長因子激活物(HGFAC)ELISA試劑盒 英文名: HGFAC ELISA Kit
小鼠甘油三酯(TG)ELISA試劑盒 英文名: TG ELISA Kit
小鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)ELISA試劑盒 英文名: GAPDH/G3PDH ELISA Kit
小鼠甘露糖結合凝集素(MBL)ELISA試劑盒 英文名: MBL ELISA Kit
小鼠鈣衛蛋白(CALP)ELISA試劑盒 英文名: CALP ELISA Kit
小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA試劑盒 英文名: CCB ELISA Kit
小鼠鈣調素(CAM)ELISA試劑盒 英文名: CAM ELISA Kit
小鼠鈣結合蛋白(CR)ELISA試劑盒 英文名: CR ELISA Kit
小鼠鈣非依賴型磷脂酶A2(iPLA2)ELISA試劑盒 英文名: iPLA2 ELISA Kit
小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒 英文名: sIgA ELISA Kit
小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒 英文名: sPLA2 ELISA Kit
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