細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

公司向您推薦大鼠胰腺上皮細胞規格的詳細說明：

產品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩定。在技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。科技提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、科技售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
細胞株的培養和傳代培養：
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10％小牛血清和抗生素的培養液中，培養對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養，根據細胞生長特性，在適當的時候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代：
直接離心后吸去培養上清液，用新鮮培養液稀釋懸浮細胞，一般按1：2-1：5 稀釋細胞后，分瓶繼續培養。
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實驗操作步驟： 
a．采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養皿1個，細胞培養瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

GN 增菌液2,4,6-三嘧啶 98%乳糖（腦膜炎奈瑟氏菌）pUNO1-hLSP1a

SS 瓊脂三氟磺酸錫 98%蔗糖（腦膜炎奈瑟氏菌）pUNO1-hLTA

SS 瓊脂平板三氟烷磺酸銩 98%果糖（腦膜炎奈瑟氏菌）pUNO1-hLTBa

克氏雙糖鐵瓊脂（KI）三氟磺酸釔(III)  98% 吖啶黃素（3.0mg）pUNO1-hLTBR

克氏雙糖鐵瓊脂（KI）斜面（限供汽運）三氟烷磺酸鐿 97%萘啶酮酸（5.0mg）pUNO1-hLTN

培養基三氟烷磺酸鐿水合物 99.9% metals basis膽汁七葉苷瓊脂pUNO1-hMAGEA3

尿素瓊脂基礎（pH7.2）三氟烷磺酸鋅 98%腦心浸液肉湯pUNO1-hMAP2K1

40%尿素溶液偶姻 97%含1%水楊苷的PY培養基pUNO1-hMAP2K2

尿素瓊脂斜面（pH7.2）偶姻 分析標準品，單聚體乳酸菌成套生化鑒定管pUNO1-hMAP3K14

尿素瓊脂斜面（pH7.2）偶姻 Natural,≥96%（GC), FCC麥芽糖發酵管pUNO1-hMAP3K3b

大鼠胰腺上皮細胞規格基環己烷 99%Cinnamaldehyde；肉桂醛莠滅凈Rat Adamts4(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 4) ELISA Kit

Rat Reg4(RegeneRating islet-derived protein 4) ELISA Kit

基環己烷 for HPLC,≥99%α-Terpineol；α-松油醇葉黃素Rat Tnnt1(Troponin T, slow skeletal muscle) ELISA Kit

Rat Nfkb1(Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit) ELISA Kit

基環己烷  光譜級,≥99%Tacrolimus；他克莫司酸鈣稀釋劑Rat Prss1(Anionic trypsin-1) ELISA Kit

Rat Shh(Sonic hedgehog protein) ELISA Kit

基異基醇(MIBC)  99%Tamoxifen；他莫昔芬化鉀Rat TRY4(Trypsin-4) ELISA Kit

Rat Bsg(Basigin) ELISA Kit

異酰酸酯 98%3-Methylvaleric Acid；3-基戊酸荷荷巴油Rat Erbb2(Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2) ELISA Kit

Rat Mt2(Metallothionein-2) ELISA Kit

基異基酮  for HPLC, ≥99.5%Nateglinide；那格列奈小葉榕干粉Rat ACE2(Angiotensin-converting enzyme 2) ELISA Kit

Rat Lss(Lanosterol synthase) ELISA Kit

基異基酮 ACS, ≥98.5%Taraxasterol；蒲公英甾醇石油鈉Rat Prkaca(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit alpha) ELISA Kit

Rat Ogdh(2-oxoglutaRate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit

氨基酸酯 99%Hydroxytyrosol；羥基酪醇聚合鋁Rat Thra(Thyroid hormone receptor alpha) ELISA Kit

Rat Ctss(Cathepsin S) ELISA Kit

ACS，98.5%Palmatine hydrochloride；鹽酸巴馬汀/鹽酸掌葉防己堿人參提取物Rat Aanat(Serotonin N-acetyltransferase) ELISA Kit

Rat Ikbkb(Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit beta) ELISA Kit

叔醇鈉 98%Nomilin；諾米林羧基纖維素鈣Rat Cbs(Cystathionine beta-synthase) ELISA Kit

Rat SDC1(Syndecan-1) ELISA Kit