培養細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

 產品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩定。在技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。科技提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、科技售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

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細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
培養操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。      
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉湯（TPGYT 基礎）Fmoc-D-烯基甘氨酸 96%3%NaCl鳥氨酸脫羧酶pUNO1-hIRGM

胰蛋白酶FMOC-D-3-(4-吡啶基)-氨酸 98%MR-VPpUNO1-hIRS1

厭氧卵黃瓊脂基礎FMOC-L-3-(3-吡啶基)-氨酸 98%1%NaCl甘露醇pUNO1-hISG20

50%卵黃鹽水懸液FMOC-L-3-(2-吡啶基)-氨酸 97%OFpUNO1-hCXCL11

明膠磷酸鹽緩沖液FMOC-D-3-(2-吡啶基)-氨酸 98%1%NaCl乳糖pUNO1-hITCHb

培養基FMOC-L-4-基苯氨酸 98%ONPGpUNO1-hITGA4

腸道菌增菌肉湯（EE 肉湯）FMOC-D-4-基苯氨酸 98%賴氨酸脫羧酶肉湯pUNO1-hITGB1a

改良頭孢哌酮麥康凱瓊脂（CMA）基礎FMOC-L-3-基苯氨酸 98%尿素酶pUNO1-hJAK1

頭孢哌酮溶液FMOC-D-3-基苯氨酸 98%1%NaCl纖維二糖pUNO1-hJAK2

三糖鐵(TSI)瓊脂FMOC-L-2-基苯氨酸 97%明膠pUNO1-hJUN

大鼠卵巢成纖維細胞規格硫酸銫 99.9%超濾離心管 96個/盒葉醇Rat Prf1(Perforin-1) ELISA Kit

Rat Ppp3r1(Calcineurin subunit B type 1) ELISA Kit

銫 AR超濾離心管 96個/盒羥基酪醇Rat Prim2(DNA primase large subunit) ELISA Kit

Rat Ppme1(Protein phosphatase methylesterase 1) ELISA Kit

苯酸鋰 99%超濾離心管 96個/盒頭孢噻呋Rat Map2(Microtubule-associated protein 2) ELISA Kit

Rat Ocm(Oncomodulin) ELISA Kit

氟化鋰  AR,99%超濾離心管 96個/盒無水化鋰Rat Eln(Elastin) ELISA Kit

Rat Nkap(NF-kappa-B-activating protein) ELISA Kit

氟化鋰  SP,光譜純超濾離心管 96個/盒4-羥基哌啶Rat Naga(Alpha-N-acetylgalactosaminidase) ELISA Kit

Rat Bax(Apoptosis regulator BAX) ELISA Kit

氟化鋰  99.99% metals basis三道定時器卡鉑Rat Cacna1a(Voltage-dependent P/Q-type calcium channel subunit alpha-1A) ELISA Kit

Rat Adcyap1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide) ELISA Kit

氟化鋰  CP,98.5%Angelica Polysaccharide；當歸多糖新康唑Rat ADCY10(Adenylate cyclase type 10) ELISA Kit

Rat Kmo(Kynurenine 3-monooxygenase) ELISA Kit

氟化鋰  99.9% metals basisAstragalus flavone；黃芪黃酮硝苯地平Rat Ggt1(Gamma-glutamyltranspeptidase 1) ELISA Kit

Rat Tril(TLR4 interactor with leucine rich repeats) ELISA Kit

結晶鋰 AR,97.0%Chinese Yam polysaccharide；山藥多糖阿莫西林可溶性粉Rat Myl3(Myosin light chain 3) ELISA Kit

Rat S100A4(Protein S100-A4) ELISA Kit

雙(三基硅烷基)氨基鋰 95%Chitotetraose 4HCl；殼四糖間醛Rat Ptpn1(Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 1) ELISA Kit

Rat Lbp(Lipopolysaccharide-binding protein) ELISA Kit