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實驗操作步驟:
a.采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
公司向您推薦大鼠卵巢顆粒細胞價格的詳細說明:
產品名稱 | 大鼠卵巢顆粒細胞價格 |
規格 | 5×105 |
貨號 | YS-X6586 |
產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。科技提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、科技售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞株的培養和傳代培養:
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10%小牛血清和抗生素的培養液中,培養對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養,根據細胞生長特性,在適當的時候進行傳代,一般3~4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代:
直接離心后吸去培養上清液,用新鮮培養液稀釋懸浮細胞,一般按1:2-1:5 稀釋細胞后,分瓶繼續培養。?
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養皿1個,細胞培養瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
無菌鹽水三氟烷磺酸鏑 98%7%NaCl胰胨水pUNO1-hIRAK4a
PW1,4-二溴萘 98%10%NaCl胰胨水pUNO1-hIRAKMa
葡萄糖瓊脂2,6-二溴萘 99%3%NaCl阿拉伯糖pUNO1-hIRF1
氧化酶試紙2,7-二溴萘 98%3%NaCl乳糖pUNO1-hIRF3
氧化酶試劑D-烯基甘氨酸鹽酸鹽 95%3%NaCl甘露醇pUNO1-hIRF4b
培養基三氟酮酸酯 98%3%NaCl蔗糖pUNO1-hIRF5a
革蘭氏染色液三氟磺酸鉺 98%3%NaCl氨基酸脫羧酶對照pUNO1-hIRF6
庖肉培養基基礎三氟磺酸銪 98%3%NaClpUNO1-hIRF7a
庖肉牛肉粒FMOC-L-炔基甘氨酸 98%3%NaCl精氨酸雙水解酶pUNO1-hIRF8
庖肉培養基FMOC-D-炔基甘氨酸 96%3%NaCl賴氨酸脫羧酶pUNO1-hIRF9
大鼠卵巢顆粒細胞價格氧鋯 水合物 AR,99.5%超濾離心管 96個/盒3-溴基-2-環基-4-(4'-氟)喹啉Rat Pgk1(PhosphoglyceRate kinase 1) ELISA Kit
Rat Aadat(Kynurenine/alpha-aminoadipate aminotransferase, mitochondrial) ELISA Kit
溴硝醇 分析標準品超濾離心管 96個/盒大豆異黃酮Rat Aopep(Aminopeptidase O) ELISA Kit
Rat Gad1(Glutamate decarboxylase 1) ELISA Kit
溴硝醇 98%超濾離心管 96個/盒伊馬替尼Rat Atp5b(ATP synthase subunit beta, mitochondrial) ELISA Kit
Rat Pvalb(Parvalbumin alpha) ELISA Kit
2-基苯胺 98%超濾離心管 96個/盒塞來昔布Rat ACO2(Aconitate hydRatase, mitochondrial) ELISA Kit
Rat Pmp22(Peripheral myelin protein 22) ELISA Kit
正基鋰正己烷溶液 1.6M 己烷溶液(15%溶液)超濾離心管 96個/盒4-(3-基)氨基-3-吡啶磺酰胺Rat Gc(Glucagon) ELISA Kit
Rat St2a1(Bile salt sulfotransferase) ELISA Kit
正基鋰 2.7M 己烷溶液(25%溶液)超濾離心管 96個/盒京尼平Rat Slc27a1(Long-chain fatty acid transport protein 1) ELISA Kit
Rat Sncg(Gamma-synuclein) ELISA Kit
正基鋰正己烷溶液 2.2M 己烷溶液(20%溶液)超濾離心管 96個/盒富硒酵母粉Rat Pgr(Progesterone receptor) ELISA Kit
Rat Lipe(Hormone-sensitive lipase) ELISA Kit
溴素 ACS超濾離心管 96個/盒卡波姆941Rat Acaca(Acetyl-CoA carboxylase 1) ELISA Kit
Rat Tcn2(Transcobalamin-2) ELISA Kit
正基鋰 2.5M 己烷溶液超濾離心管 96個/盒新戊二醇Rat Jun(Transcription factor AP-1) ELISA Kit
Rat Adra1a(Alpha-1A adrenergic receptor) ELISA Kit
硫酸銫 AR,99.5%超濾離心管 96個/盒哈茨木霉菌Rat Drd1(D(1A)dopamine receptor) ELISA Kit
Rat STK11(Serine/threonine-protein kinase STK11) ELISA Kit
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
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