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細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。科技提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、科技售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用.
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
大鼠卵巢上皮細胞 | 5×105 | YS-X6584 |
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培養操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.
氧化酶試劑BOC-L-4-基苯氨酸 98%鼠李糖發酵管pUNO1-hIL39(ebi3p19)
阪崎腸桿菌顯色培養基(DFI 瓊脂)BOC-D-4-基苯氨酸 98%七葉苷pUNO1-hIL03RA
鳥氨酸脫羧酶試驗BOC-L-3-基苯氨酸 98%甘露醇發酵管pUNO1-hIL4a
賴氨酸脫羧酶試驗BOC-D-3-基苯氨酸 98%木糖發酵管pUNO1-hIL04Ra
精氨酸脫羧酶試驗BOC-L-2-基苯氨酸 98%鹽肉湯pUNO1-hIL05
培養基BOC-D-2-基苯氨酸 98%七葉苷pUNO1-hIL05RAa
氨基酸脫羧酶試驗對照BOC-D-4-溴苯氨酸 98%鼠李糖發酵管pUNO1-hIL06
無菌液體石蠟BOC-L-2-溴苯氨酸 98%木糖發酵管pUNO1-hIL06Ra
鉀(KCN)培養基BOC-L-3,4-二苯氨酸 98%甘露醇發酵管pUNO1-hIL06STa
鉀(KCN)對照培養基BOC-D-3,4-二苯氨酸 98%葡萄糖pUNO1-hIL07a
大鼠卵巢上皮細胞醋酸鈰 99.9% metals basis改良型RPMI 1640 高糖培養基水性環氧底漆Rat P4ha1(Prolyl 4-hydroxylase subunit alpha-1) ELISA Kit
Rat Atp6ap2(Renin receptor) ELISA Kit
鉺,五水 99.9% metals basis一次性針頭式濾器 (PES膜) 直徑33mm 250個/盒 過濾血清 Millipore間苯二胺Rat Hspa8(Heat shock cognate 71 kDa protein) ELISA Kit
Rat Calb1(Calbindin) ELISA Kit
硫酸鉺(III)八水化合物 99.9% metals basis一次性針頭式濾器 (PVDF膜) 直徑33mm 250個/盒 MilliporeN-Boc-4-苯胺基哌啶Rat Rnls(Renalase) ELISA Kit
Rat Slc30a1(Zinc transporter 1) ELISA Kit
釓,六水 AR,99%一次性針頭式濾器 (PVDF膜) 直徑33mm 250個/盒 Millipore玉米淀粉制品增白劑Rat LDL(Low-density lipoprotein) ELISA Kit
Rat Cdk16(Cyclin-dependent kinase 16) ELISA Kit
釓,六水 99.99% metals basis凍存管 500支 '2.0ml螺口無蓋棕色離心管,可立,聚烯,未滅菌 500/包,8包/箱谷維素(伽瑪谷維素)Rat Ripk3(Receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 3) ELISA Kit
Rat MT-1(Metallothionein-1) ELISA Kit
鎵(III) 水合物 99.9% metals basis袋裝吸頭 '1000ul藍色吸頭,斜嘴,未滅菌,袋裝 1000/包,8包/箱枸櫞酸莫沙必利Rat Reg3a(RegeneRating islet-derived protein 3-alpha) ELISA Kit
Rat Arg1(Arginase-1) ELISA Kit
鎵(III) 水合物 99.99% metals basis盒裝無菌吸頭 '1000ul盒裝滅菌藍色吸頭,100支/盒,10盒/大盒,5大盒/箱1-基-3-基咪唑溴鹽Rat Prdx2(Peroxiredoxin-2) ELISA Kit
Rat Atp1a3(Sodium/potassium-transporting ATPase subunit alpha-3) ELISA Kit
鎵(III) 水合物 99.999% metals basis袋裝吸頭 '200ul黃色吸頭,斜嘴,未滅菌,袋裝 1000/包, 20包/箱2-基咪唑Rat Dnase1(Deoxyribonuclease-1) ELISA Kit
Rat Npr2(Atrial natriuretic peptide receptor 2) ELISA Kit
釓,六水 99.9% metals basis盒裝無菌吸頭 200ul 盒裝滅菌黃吸頭,96支/盒,10盒/大盒,5大盒/箱α-酮戊二酸Rat Eif2ak2(Interferon-induced, double-stranded RNA-activated protein kinase) ELISA Kit
Rat Ppargc1a(Peroxisome prolifeRator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha) ELISA Kit
銦 98%吸頭(短) 0.5-10ul透明吸頭,滅菌,袋裝 1000/包, 20包/箱N,N-二氨基-2-烷鹽酸鹽Rat Crhr1(Corticotropin-releasing factor receptor 1) ELISA Kit
Rat Cldn3(Claudin-3) ELISA Kit
培養細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
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