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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>科研抗體>>一抗>> 0.1ml/100μgAnti-phospho-ROCK2(Tyr256)抗體

Anti-phospho-ROCK2(Tyr256)抗體

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號0.1ml/100μg

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-12-30 23:19:30瀏覽次數(shù):197次

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產(chǎn)地 進口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研 中文名稱 磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體
規(guī)格 0.1ml/100μg 貨號 YSRIBIO-019273
Anti-phospho-ROCK2(Tyr256)抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品*,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。

中文名稱  磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體
英文名稱  Anti-phospho-ROCK2(Tyr256)
1mg/1ml

規(guī) 0.1ml/100μg

抗體來源 Rabbit

克隆類型 polyclonal

交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Guinea Pig

產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體

研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

蛋白分子量 predicted molecular weight: 153kDa

Lyophilized or Liquid

KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human ROCK2 around the phosphorylation site of Tyr256

IgG

純化方法 affinity purified by Protein A

0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

(石蠟切片需做抗原修復(fù))

ROCK2(phospho Y256); p164 ROCK 2; Rho associated coiled coil containing protein kinase 2; Rho associated protein kinase 2; Rho kinase 2; ROCK 2; Rock II; Rock2m; ROK alpha; ROKalpha; ROCK2_HUMAN.

產(chǎn)品名稱

Anti-phospho-ROCK2(Tyr256)抗體

規(guī)格

0.1ml/100μg

貨號

YSRIBIO-019273

 

圖片17.jpg 

抗體的熒光標記法:

(一)基本原理

賴氨殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

(二)儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體;

2.碳suan氫鈉緩沖液;

3.疊氮鈉;

4.庵氰酸熒光素;

5.電磁攪拌器。

抗體的制備過程:

1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

抗體分子標記技術(shù):

(一)原理

當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

(二)準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;

2.儀器

凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。

(三)操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;

6.酪氨suan的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

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