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操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 人骨保護素配體(OPGL)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human osteoprotegerin ligand (OPGL) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11312 |
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試劑配制
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
TRIM32抗原 0.5mgTRIM32(tripartite motif protein 32)
細胞表面趨化因子受體1抗原 0.5mgCXCR1 (CXC-chemokine receptor 1)
髓鞘相關糖蛋白a/b(抗原) 0.5mgMAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;)
淋巴細胞生成素-1(抗原) 0.5mgTSLP(Thymic stromal lymphopoietin isoform 1)
細胞角蛋白19抗原 0.5mgCytokeratin 19
三聚氰胺與牛血清白蛋白偶聯物 1mgMelamine/BSA
熒光素標記牛IgG 0.3mlBovine IgG/FITC
熒光素Cy7標記大鼠IgG(細胞流式同型對照) 0.1mlRat IgG/Cy7
熒光素Cy3標記羊IgM 0.1mlGoat IgM/Cy3
辣根過氧化物酶標記牛血清白蛋白 0.1mlBSA/HRP
小鼠γ干擾素 96TIFN- Gamma ELISA Kit(mouse)
甲胎蛋白定量(一/二步夾心法) 96TAFP
兔結合珠蛋白/觸珠蛋白 96THpt/HP (Rabbit Haptoglobin) ELISA Kit
大鼠軸突生長誘向因子1 96T(Ntn1)ELISA Kit
人骨保護素配體(OPGL)ELISA檢測試劑盒50mL Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),1M Potassium Acetate Solution,1M 常溫保存
50mL Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),1M,pH7.5 Potassium Acetate Solution,1M,pH7.5 常溫保存
250mL Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),20% Potassium Acetate Solution,20% 常溫保存
100mL Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),8M Potassium Acetate Solution,8M 常溫保存
50mL Potassium Chloride Solution(溶液),1M Potassium Chloride Solution,1M 常溫保存
50mL Potassium Chloride Solution(溶液),3M Potassium Chloride Solution,3M 常溫保存
50mL Potassium Chloride Solution(溶液),5M Potassium Chloride Solution,5M 常溫保存
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.0 Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.0 常溫保存
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.2 Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.2 常溫保存
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.4. Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.4. 常溫保存
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.5 Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.5 常溫保存
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.6 Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.6 常溫保存
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH8.0 Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH8.0 常溫保存
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