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試劑配制
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 人谷胱甘肽S轉移酶(GSTs)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human glutathione S transferase (GSTs) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11308 |
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
磷酸化血管內皮生長因子受體2抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1059)
WD重復蛋白16抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:WDR16
鋅指蛋白Zdhhc18抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:ZDHHC-18
鋅指蛋白437抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:ZBTB2
硫氧還蛋白還原酶抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:2 Cys Peroxiredoxin
磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-SHP2 (Tyr584)
鉀依賴鈉鈣交換蛋白6抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:SLC6A19
磷酸化核突觸蛋白α抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:phospho-Alpha synuclein(Ser129)
造血細胞磷酸酶抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:SHP-1
沉默調節相關蛋白4抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:SIRT4
Shh信號轉導通路膜蛋白受體抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:Shh
超氧化物歧化酶3抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:SOD3
羊抗牛IgG抗血清 1mlGoat anti-Bovine IgG whole serum
FITC標記的兔抗犬IgM抗體 0.1mlDog IgM/FITC
人谷胱甘肽S轉移酶(GSTs)ELISA檢測試劑盒250mL Phosphate Buffer,0.5M, pH9.0 Phosphate Buffer,0.5M, pH9.0 常溫保存
250mL Phosphate Buffer,0.5M, pH9.5 Phosphate Buffer,0.5M, pH9.5 常溫保存
250mL Phosphate Buffered RIPA Phosphate Buffered RIPA 常溫保存
125mL Phosphate Buffered RIPA,2X Phosphate Buffered RIPA,2X 常溫保存
250mL Phosphate Buffered Saline (PBS),10X, pH7.4 Phosphate Buffered Saline (PBS),10X, pH7.4 常溫保存
250mL Phosphate Buffered Saline (PBS),1X Phosphate Buffered Saline (PBS),1X 常溫保存
500mL Phosphate Buffered Saline Dulbecco’s,10X Phosphate Buffered Saline Dulbecco’s,10X 常溫保存
4000mL Phosphate Buffered Saline,10X (for blot washing) Phosphate Buffered Saline,10X (for blot washing) 常溫保存
500mL Phosphate Buffered Saline,10X,without potassium Phosphate Buffered Saline,10X,without potassium 常溫保存
250mL Phosphate Citrate Buffer,2X Phosphate Citrate Buffer,2X 常溫保存
500mL Phospho-Protein Extraction Buffer Phospho-Protein Extraction Buffer 常溫保存
500mL Phospho-Protein Extraction Buffer I Phospho-Protein Extraction Buffer I 常溫保存
500mL Phospho-Protein Extraction Buffer II Phospho-Protein Extraction Buffer II 常溫保存
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
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