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操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 人孕激素/孕酮(PROG)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human estrogen / progesterone (PROG) ELISA Kit |
貨號 | YS-H12677 |
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試劑配制
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
µ-型阿片受體抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:mu Opioid receptor
血小板源性生長因子受體A抗體(PDGFRα) 規格: 0.1ml 英文名稱:PDGFRA
浦肯野細胞相關蛋白1抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:Puratrophin 1
植烷酸氧化酶抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:PHYHIP
磷酸化血小板源性生長因子受體-B抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009)
磷脂酸磷酸酶2結構域3抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:PPAPDC3
磷酸脂磷酸水解酶1抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:PPAP2A
磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-Paxillin(Ser178)
神經叢蛋白A1抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:Plexin A1
原鈣粘蛋白γC4抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:PCDHGC4
磷酸化血小板源性生長因子受體α 規格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-PDGFRA(Tyr572)+PDGFRB(Tyr579)
P2Y4受體抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:P2Y4
轉錄因子Pax6抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:PAX6
3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:PDPK1
人孕激素/孕酮(PROG)ELISA檢測試劑盒苯甲酰原堿 466-24-0 規格: 20mg
氧化硼 規格: 10g
文多靈 2182-14-1 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
雷公藤乙素 38647-10-8 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
阿魏酸乙酯 4046-02-0 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
擬人參皂甙 RT5 98474-78-3 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
甘草酸 1405-86-3 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
豆苷 552-66-9 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
異土木香內酯 470-17-7 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
知母皂苷E 136565-73-6 規格: HPLC≥98%,10mg/vial
白當歸腦 26091-79-2 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
姜黃素 458-37-7 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
桂醇 104-54-1 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
D-古洛糖 4205-23-6 規格: 50MG
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