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布氏桿菌(BS)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-11-21 11:06:52瀏覽次數:135次

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規格 50T 貨號 YS-P014305
品牌 YSRIBIO
布氏桿菌(BS)檢測試劑盒(熒光-PCR法)原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
服務流程:

公司產品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱

規格

貨號

布氏桿菌(BS)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

50T

YS-P014305

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

QQ截圖20191211135002.jpg 

PCR反應的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

組蛋白H4抗體25(S)-魯斯可皂苷元-1-O-α-L-吡喃鼠李糖... Boc-Asp(OtBu)-OH

乙酰化組蛋白H4抗體25-脫水澤瀉A;澤瀉G(標準品) Boc-D-Pro-OH

三化組蛋白H3抗體26-脫氧升麻苷 Boc-Ser-OMe

二化組蛋白H3抗體28-O-順芷酰匙羹藤新苷元 N-BOC-O-Benzyl-L-serine

二化組蛋白H3K4抗體28-去-β-香樹脂 Boc-Thr-OH

二化組蛋白H3K9抗體28-去-β-香樹脂(標準品) Boc-L-Trp(For)-OH

三化組蛋白H3抗體2’-乙酰毛蕊花糖苷(標準品) Boc-D-Tyr-OH

乙酰化組蛋白H3抗體2"-O-沒食子酰金絲桃苷(標準品) Boc-Tyr-OMe

乙酰化組蛋白H3抗體3"-O-表沒食子兒茶素沒食子酯 Boc-O-(2-bromo-Cbz)-L-Tyrosine
布氏桿菌(BS)檢測試劑盒(熒光-PCR法)BJP(Human Bence-Jones protein) ELISA Kit  人本周蛋白聚二 average Mn 200

CEF(Human Carcinoembryonic Ferritin) ELISA Kit  人癌胚鐵蛋白聚二 average Mn 1000

SCCAg(Human squamous cell carcinoma related antigen) ELISA Kit  人鱗狀癌相關抗原聚二 average Mn 1500

TSA(Human tumor specific antigen) ELISA Kit  人腫瘤特異性抗原聚二 average Mn 2000

MMSAM(Human melanoma metastasis surface adhesion molecule) ELISA Kit  人黑色素瘤轉移表面黏附分子聚二 average Mn 4000

BRCA-2(Human breast cancer susceptibility protein 2) ELISA Kit  人癌易感蛋白2聚二 average Mn 6000

ASK-1(Human apoptosis signal regulating kinase 1) ELISA Kit  人凋亡信號調節激酶I聚二 average Mn 800

BAX(Human Bcl-2 associated X protein) ELISA Kit  人Bcl-2相關X蛋白聚二 average Mn 600


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