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同其他檢測項目一樣,真菌毒素的檢測也包括抽樣、制樣、分析檢測等步驟。那么,這些步驟中哪個對真菌毒素的檢測結果影響較大呢?
根據相關文獻(1974,Whitaker & Dicken)報道,在真菌毒素分析檢測過程中,其誤差產生的概率如下圖所示。
從上圖我們可以看出:*步的抽樣是zui為關鍵的,其錯誤概率高達88%,二次抽樣錯誤概率為10%,而分析方法的錯誤概率僅為2%,由此可見抽樣及二次抽樣的關鍵性。
一、抽樣的關鍵性
造成抽樣及二次抽樣步驟容易出現誤差主要是兩方面的原因:
1、真菌毒素在樣品中的分布是不均勻的
上圖以蛋白質和真菌毒素在樣品中的分布情況向我們表明真菌毒素分布的不均勻性。
2、真菌毒素檢測的精度都在ppb級別
ppb即10億分之一,是一個非常微量的單位,沒有足夠的抽樣量,會造成很大的誤差影響。
下表為美國*提供的信息,在一卡車玉米中加標20ppb的huang曲霉毒素污染情況。
從上表可以得知,如果只取0.45公斤的玉米,檢測到的污染數值范圍為0-46.9ppb;而若抽樣量為4.5公斤,其檢測范圍為11.6-28.4ppb,由此可見因為抽樣量的不同,引起的誤差范圍就會相去甚遠。
二、抽樣注意事項
1、抽樣的原則
由于真菌毒素分布的隨機性,抽樣的時候要做到多點、隨機、均勻,使得每個部位都有相同的概率被取到。
2、抽樣的數量
FAO和WTO建議沒200公斤物料抽樣一次,如果所抽樣品是混合比較均勻的粉狀物料,可以適當的減少抽樣點數
在實際工作中由于人力、物力有限,所以在實際操作中抽樣點數應根據企業實際情況以及物料情況來確定抽樣點數。
3、抽樣量
原料送檢樣品抽樣成品可在500g,原料樣品在1000g,這樣可以保證檢測的zui低檢測量和檢測樣品的霉菌毒素的分布均一性。
三、具體抽樣方法
1、流動物料抽樣
抽樣方式:采用適當的取樣設備,并控制物料流的速度,使得采樣器能從整個物料流截面采樣而不會溢出。
適用范圍:適用于運輸卡車、火車、輪船散裝物料卸料時;筒倉物料存儲抽樣口抽樣;飼料企業打包出料口抽樣。
2、散裝物料抽樣
抽樣方式:采用探針式采樣器。 探針采樣器的長度應該能夠刺到容器底部。
適用范圍:適用于駁船、漏斗車、廂式貨車、卡車、火車廂、槽車運輸的散裝物料。
3、袋裝物料抽樣
選擇適當長度采樣器,將探針采樣器從包裝袋一角斜插到對角。
采樣器長度必須和包裝袋對角線長度接近。
4、圓桶倉存儲物料抽樣
對于料倉存儲的物料,只有在出料口采樣流動物料采樣方案才可能獲得具有代表性的樣品。
若料倉中物料儲量不多時,也可以分散取多點采樣以獲得比較有代表性的樣本。
5、飼料生產過程抽樣
在出料扣安裝自動采樣設備或者采用鵜鶘嘴抽樣器抽樣。
對已經進入倉庫的飼料,按照袋裝物料的采樣程序進行抽樣。
6、倉儲飼料抽樣
對已經進入倉庫的飼料,按照袋裝物料的采樣程序進行抽樣。
7、養殖場飼料及原料抽樣
飼料樣品從料槽中中采樣,每個料槽采樣量可在500g,料槽應該隨機性選擇原料樣品應該從存儲袋中按照多個采樣點抽樣,每次抽樣可1000g。
上海飛測生物基于的熒光定量FPOCT技術平臺,推出了霉菌毒素移動檢測平臺--霉菌毒素熒光定量快速檢測箱,結合了膠體金快速、酶聯免疫定量以及色譜法準確的特點,可在8min內快速準確定量的測定出糧油谷物飼料中的霉菌毒素,包括huang曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素A、伏馬菌素、T2毒素等含量,樣品前處理簡單(僅需7min),六種毒素一次提取即可,操作簡便,只需一步加樣,無需標準品,無需做標準曲線,結果準確可靠且可現場打印,準確性高度符合HPLC法的檢測結果,為霉菌毒素的快速現場檢測提供了一種全新的技術手段,適用于各類原料收儲、糧油加工企業、飼料加工企業、養殖企業及政府相關監管部門。
二、 霉菌毒素熒光定量快速檢測箱的組成
三、霉菌毒素檢測項目及性能參數
四、檢測樣本適用范圍
五、檢測過程
5.1 樣品前處理過程
1、 粉碎;
2、 振蕩提取(5min);
3、 離心(2min);
5.2 檢測過程
1、 稀釋;
2、 加樣反應(8min);
3、 讀數,打印檢測報告;
5.3 結果判斷和輸出
采用便攜式霉菌毒素熒光定量檢測儀進行讀數,檢測結果更加準確、客觀。
檢測結果將呈現于熒光讀數儀液晶顯示屏上,同時可按打印鍵打印獲得紙質的檢測報告,另外,開通儀器的WIFI數據上傳功能后,檢測相關數據信息將自動上傳至“食品安全溯源管理云平臺”,便于溯源及質量管理。
六、上海飛測熒光定量FPOCT技術平臺與其他方法學技術性能的對比
七、上海飛測生物霉菌毒素熒光定量快速檢測系統優點
? 8min快速準確定量檢測:集膠體金快速檢測、酶聯免疫定量檢測、色譜質譜準確檢測的特點于一身,可在8min內實現多種霉菌毒素的快速準確定量測定;
? 內置定量標準曲線:儀器內置標準曲線,無需使用標準品,無需檢測時再做標準曲線,既節省了成本,也避免了操作人員與霉菌毒素的接觸,保護操作人員的安全;
? 多合一的樣品前處理過程:前處理方法統一,一種提取液一次提取即可檢測所有種類的霉菌毒素,無需對提取液進行任何pH的調節,大大提升檢測的便捷性和效率;
? 隨到隨檢:無需做標準曲線,對檢測樣本量無要求,既可單個或少量樣本隨到隨檢,也可大量樣本同時檢測,檢測成本無區別;既可用于實驗室常規質控檢測,也可用于收糧現場檢測,確保原料收購的質量;
? 操作簡便:對配套的儀器設備和檢測人員要求低,操作人員僅需短期培訓就能熟練掌握;
? 行標支持,國糧局驗證:基于行業標準LST6111-2015、LST6112-2015和LST6113-2015,并通過國糧局及農科院的驗證;
? 樣本適用范圍廣:采用時間分辨熒光技術,抗基質干擾強,樣本適用性廣,既可檢測小麥、玉米、大米等原糧,也可檢測各種粕類、麩皮、DDGS等飼料原料,還可檢測花生油、玉米油等各種植物油;
? 數據上傳及溯源管理:熒光定量分析儀具備數據無線上傳的功能,可根據客戶的需求定制開發相應的數據管理和溯源管理系統,實現公司總部對各分公司、上級監管部門對下級監管部門或者監管部門對各監管對象檢測數據的實時掌握和分析;
? 經濟實惠:花膠體金試紙條的價格,獲得色譜檢測的質量和結果,并且節省人力物力,大幅降低檢測費用;
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