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閱讀:150發布時間:2018-2-10
動物血清elisa試劑盒在用螢火蟲熒光素酶定量基因表達時 ,通常采用第二個報告基因來減少實驗的變化因素。但傳統的共報告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不夠便利。因為各自的測試化學,處理要求,檢測特點存在差異。Promega提供一種*的雙報告基因技術,結合了螢火蟲熒光素酶測試和海洋腔腸熒光素酶測試。雙熒光素酶報告基因測試系統,結合pRL載體系統,表達第二個報告基因海洋腔腸熒光素酶,在單管中進行雙熒光素酶報告基因測試,快速,靈敏,簡便。系統還提供PLB裂解液,用來裂解在多孔板中培養的哺乳細胞,不需操作單個樣品。對于正在使用螢火蟲熒光素酶報告基因載體的研究人員。雙熒光素酶報告基因測試系統將使他們立即體會到該系統的便利。
介 紹
雙報告基因用于實驗系統中作相關的或成比例的檢測,通常一個報告基因作為內對照,使另一個報告基因的檢測均一化。檢測基因表達時雙報告基因通常用來瞬時轉染培養細胞,帶有實驗報告基因的載體共轉染帶有不同的報告基因作為對照的第二個載體。通常實驗報告基因偶聯到調控的啟動子, 研究調控基因的結構和生理基礎。報告基因表達活力的相對改變與偶聯調控啟動子轉錄活力的改變相關,偶聯到組成型啟動子的第二個報告基因,提供轉錄活力的內對照, 使測試不被實驗條件變化所干擾。
通過這種方法,可減少內在的變化因素所削弱的實驗準確性,比如,培養細胞的數目和活力的差別,細胞轉染和裂解的效率。
使用螢火蟲熒光素酶,結合*乙酰轉移酶(CAT),β-半乳糖苷酶(β-Gal),或葡萄醛酸糖苷酶(GUS)的雙報告基因,近幾年已普遍使用。但這些雙報告基因組合削弱了熒光 素酶操作的優勢 , 比如熒光素酶測試和定量可在幾秒鐘內進行, 但CAT,β-Gal和GUS測試法, 則在定量前需要長時間的保溫。另外,這些報告基因受限于它們的靈敏度和線性應答范圍, 動物血清elisa試劑盒必須注意不要超過這些范圍,內源性細胞活力也會干擾這類報告基因的使用。許多類型的細胞有內源β-Gal或GUS表達,不利于準確定量報告基因表達, 胞內去乙酰酶活力干擾CAT活力測試。盡管在高溫下預處理細胞裂解液,會降低內源性β-Gal和CAT測試的干擾,但這些處理也會快速失活熒光素酶。因此,在此類雙報告基因檢測中, 必須以不同的步驟分別處理共轉染的細胞裂解液。
Methyl Caprylate 111-11-5 300mg 辛酸甲酯標準品
Methyl Ethyl Ketone 78-93-3 1.2ml×3ampules 2-丁酮¤標準品
Methyl Isobutyl Ketone 108-10-1 1.2ml×3ampules 甲基異丁基甲酮標準品
Methyl Laurate 111-82-0 500mg 月桂酸甲酯標準品
Methyl Linoleate 112-63-0 5×50mg *甲酯標準品
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動物血清elisa試劑盒
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