動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定，在去除洗滌過(guò)程中的一些非特異結(jié)合上很有用。但它們只在存在時(shí)起作用，因?yàn)楹苋菀妆幌吹簟Ｒ虼怂邢礈煲褐幸脖仨毺砑臃忾]液。請(qǐng)勿使用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%)，它會(huì)降低特異結(jié)合，產(chǎn)生假陰性。另一個(gè)選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液，后者可協(xié)助洗滌過(guò)程中的封閉。
蛋白封閉液則有所不同，是*的。它們與開放位點(diǎn)結(jié)合并封閉，同時(shí)穩(wěn)定與微孔板結(jié)合的抗原分子。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過(guò)，它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個(gè)問(wèn)題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。
我們通常會(huì)follow師兄師姐留下來(lái)的操作步驟，但是如果試劑稍有不同，則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住，非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景。為了防止這一點(diǎn)，切勿使用過(guò)多的一抗或二抗。
檢測(cè)試劑要適量
動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒另一點(diǎn)也很顯而易見：切勿使用過(guò)多的檢測(cè)試劑。如果濃度過(guò)高，或者未正確稀釋，則會(huì)導(dǎo)致高背景。也不要顯色過(guò)度，如有必要，優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。
如果您的ELISA試劑盒操作中不幸地遇到了高背景，那么也無(wú)需太擔(dān)心，依次查看ELISA系統(tǒng)中的組分，并排除可能存在的問(wèn)題。悉心優(yōu)化，相信很快就會(huì)有漂亮的結(jié)果。
NCK銜接因子蛋白2IgG 小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)
Nemo樣激酶IgG 小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)
NFAM1IgG 小鼠糖原合成酶激酶(GSK)
NFkB誘導(dǎo)的激酶IgG 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)
NF-κB活化激酶IgG 小鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)
NK細(xì)胞表面抑制性受體CD94IgG 小鼠糖蛋白130(gp130)
NK細(xì)胞受體/自然殺傷細(xì)胞活化性受體IgG 小鼠碳酸酐酶2(CA-2)
NK細(xì)胞受體2A/自然殺傷細(xì)胞活化性受體2AIgG 小鼠碳酸酐酶(CA)
NK細(xì)胞受體2C/自然殺傷細(xì)胞活化性受體2CIgG 小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)
NK細(xì)胞受體BY55IgG 小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒胞質(zhì)IgG(MPO-ANCA IgG)
動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒
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