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大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞；L6運(yùn)輸

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更新時(shí)間：2017-04-10 13:09:55瀏覽次數(shù)：137次

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上海一研生物科研有限公司

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大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞；L6運(yùn)輸采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱 大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞；L6運(yùn)輸
形態(tài)特性成肌細(xì)胞

生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)

特征特性 L6成肌細(xì)胞株是Yaffe從甲基膽蒽存在下大鼠大腿肌的原代培養(yǎng)物zui初兩代中分離得到。 L6細(xì)胞在培養(yǎng)基中融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維。細(xì)胞融合的程度隨著代數(shù)的增加而下降，因而細(xì)胞應(yīng)冷凍于低代次階段并周期性地重新克隆以選擇融合能力強(qiáng)的細(xì)胞。如果讓培養(yǎng)容器中的細(xì)胞長(zhǎng)滿，這株細(xì)胞的成肌組分將迅速耗盡。檢測(cè)表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

傳代情況 PN5

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS　

支原體檢測(cè) 陰性　

STR
同工酶

染色體

使用權(quán)限    A類
大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞；L6運(yùn)輸冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞；L6運(yùn)輸操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
購(gòu)買大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞；L6運(yùn)輸注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
Streptomycescandidusvar.alboroseus   純白鏈霉菌粉白變種 Lactobacillusplantarum植物乳桿菌
吉丹鏈霉菌   Streptomycesgedanensis Proteusvulgaris普通變形桿菌
麥芽糖假絲酵母   Candidamaltosa Alcaligenesxylosoxidans木糖氧化產(chǎn)堿桿菌
Clostridiumbutylicom   丁酸梭菌 Enterobacteraerogenes產(chǎn)氣腸桿菌
Rhizopusarrhizus   少根根霉 Pseudomonasstutzeri斯氏假單胞菌
Streptosporangiumalbum   白色鏈孢囊菌 Pseudomonasfluorescens螢光假單胞桿菌
Cladosporiumdelicatulum   皺枝孢 Pseudomonasfluorescens熒光假單胞桿菌
Saccharomycespeka   中國(guó)臺(tái)灣白面酵母 Ochrobactrumsp.蒼白桿菌
鉛色青霉   Penicilliumlividum Pseudomonaspyocynaea銅綠假單胞菌
露濕漆斑菌    Bacillusthuringiensis蘇云金芽孢桿菌
Ganodermasinense   紫芝(紫靈芝，中華靈芝) Mesorhizobiumhuakuii中慢生華癸根瘤菌
銅綠假單胞菌   Pseudomnasaeruginose Streptomyceshygroscopicusvar.jinggangensis吸水鏈霉菌井崗變種
Artemisetin 艾黃素;六棱菊亭 479-90-3 388.368 C20H20O8干地黃 Rehmannia glutinosa [Syn glutinosa f. huechingensis]     Ajugol; Leonuride     益母草苷A     52949-83-4     C15H24O9     ≥98%
異黃芪皂苷I Isoastragaloside I 84676-88-0      西貝母堿苷
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor     Gamabufotalin     日蟾蜍他靈     465-11-2      C24H34O5     ≥98%474-07-7 巴西蘇木素 BRAZILIN 286.28 C16H14O5
巖白菜 Bergenia purpurascens Engl.     Bergenin     *     477-90-7     C14H16O9     ≥98%厚樸 Magnolia officinalis Rehd. et Wils.     Honokiol     和厚樸酚     35354-74-6     C18H18O2     ≥98%
銀合歡Leucaena leucocephala     Hierochin D     [2S-[2alpha,3beta,5(E)]]-2,3-二氫-7-羥基-2-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-5-(3-羥基-1-丙烯基)-3-苯并呋喃甲醇     155759-02-7     C19H20O6     ≥95%DL-薄荷醇 DL-Menthol 89-78-1 156.27 C10H20O
偽原* Pseudoprotodioscin 102115-79-7 1031.18 C51H82O21天麻 Gastrodia elata BL     Gastrodin     *     62499-27-8     C13H18O7     ≥98%
23513-08-8 8-姜酚 8-GINGEROL 322.44 C19H30O4夾竹桃Nerium oleander     Dehydroadynerigenin digitaloside     去氫歐夾竹桃甙元洋地黃苷     52628-62-3     C30H42O8     ≥95%
7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin 7-乙基-10* 86639-52-3 392.4 C22H20N2O5假黃皮Clausena excavata     Serratenediol     千層塔烯二醇，鋸齒石松烯二醇，山芝烯二醇     2239-24-9     C30H50O2     ≥95%
76135-82-5 牡荊素葡萄糖苷 ?glucosylvitexin    C27H30O16狹翅獨(dú)活Heracleum stenopterum     Smyrindioloside     1'-O-beta-D-吡喃葡萄糖基-3-羥基鬧達(dá)柯裂亭     87592-77-6     C20H24O10     ≥95.5%
大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞；L6運(yùn)輸Lappaconitine 高烏甲素 32854-75-4 584.7 C32H44N2O8山竹Garcinia mangostana     Garcinone D     伽升沃 D     107390-08-9     C24H28O7     ≥98%
香蒲新苷 Typhaneoside 104472-68-6 770.68 C34H42O20大葉千斤拔Flemingia macrophylla     2-C-Methyl-D-erythro,4-lactone     (3R,4R)-二氫-3,4-二羥基-3-甲基-2(3H)-呋喃酮     18465-71-9     C5H8O4     ≥95%
芍藥Paeonia lactiflora     Paeonilactone C     芍藥內(nèi)酯C     98751-77-0     C17H18O6     ≥95%桔紅素 5,6,7,8-tetramethoxy-2-(4-methoxyphenyl)-4-benzopyrone 481-53-8 372.3686 C20H20O7
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