上海一研生物科研有限公司
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Sephadex G50 介質10mL售后服務產品特點:離心柱法;安全:無需使用二甲苯去蠟,具有安全、有效的*去蠟方法;高質量:提取的RNA純度高,得率高;方便:操作簡單、快捷,無需*類有毒試劑,無需乙醇沉淀。
公司提供的RNA/DNA 提取,完善的實驗條件,*的設備,高素質的實驗人員,保證您Sephadex G50 介質10mL售后服務的實驗得以良好的完成。我們承諾一對一的專門服務,您可以全稱參與了解實驗進程。
Sephadex G50 介質10mL售后服務的詳細介紹:
服務流程
1)客戶提供材料
2)提取基因組RNA/DNA并確定其品質
客戶提供
●新鮮材料或正確保存條件下材料(組織、細胞、細菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一個月,-80℃保存一年血液樣品(EDTA,肝素,檸檬酸鈉抗凝)
●詳細的背景資料:來源、特點、類型等
我們提供
基因組RNA/DNA提取、實驗報告
質量保證
高純度RNA/DNA、完整性
貨期
3-5個工作日
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
bundling)、磷酸轉移酶(phosphotransferase)激活、核內RNA出核、DNA復制與DNA修復。一些生理因素,諸如低氧(hypoxia)和尿糖(diabetes),可以增加GAPDH在特定細胞中的表達。GAPDH存在于幾乎所有的組織中,以高水平持續表達。
GAPDH(甘油醛-3-磷酸脫氫酶)是參與糖酵解的一種關鍵酶,由4個30-40kDa的亞基組 GAPDH蛋白幾乎在所有組織中都高水平表達,廣泛用作Western blot蛋白質標準化的內參,是很好的內參抗體。
GAPDH 作為管家基因在同種細胞或者組織中的蛋白質表達量一般是恒定的。在實驗中,可能存在總蛋白濃度測定不準確;或者蛋白質樣品在電泳前上樣時產生的樣品間的操作誤差;這些誤差需要通過測定每個樣品中實際轉到膜上的GAPDH的含量來進行校正,所以一般的western實驗都需要進行內參設置。具體校正的方法就是將每個樣品測得的目的蛋白含量與本樣品的GAPDH含量相除,得到每個樣品目的蛋白的相對含量。然后才進行樣品與樣品之間的比較。
英文名稱 Anti-GAPDH(3E12)-Loading Control
中文名稱 3-磷酸甘油醛脫氫酶單克隆抗體(內參抗體) Phospho-LATS1 磷酸化腫瘤抑制基因LATS1試劑盒
phospho-LKB1 磷酸化*/*蛋白激酶試劑盒
phospho-LKB1 磷酸化*/*蛋白激酶試劑盒
Phospho-LKB1 磷酸化*/*蛋白激酶試劑盒
GNRH 黃體激素釋放激素類似物試劑盒
Phospho-Lamin A + C 磷酸化核纖層蛋白A/C試劑盒
Phospho-Lck 磷酸化淋巴細胞特異性蛋白*激酶試劑盒
Lyn 膜相關蛋白*激酶Lyn試劑盒
Phospho-Lyn 磷酸化膜相關蛋白*激酶Lyn試劑盒
Phospho-Lyn 磷酸化膜相關蛋白*激酶Lyn試劑盒
LRRC4 腦瘤相關基因試劑盒
LSAMP 大腦邊緣系統相關膜蛋白試劑盒
LRFN2 神經突觸粘附樣分子1試劑盒
LRFN4 富含*重復序列/Ⅲ型纖維連接蛋白4試劑盒
Laminin alpha 4 層粘蛋白α4試劑盒
Laminin alpha 4 層粘蛋白α4試劑盒
lipocalin 1 脂質運載蛋白1試劑盒
Lymphotactin 淋巴細胞趨化因子試劑盒
LRP5L 低密度脂蛋白受體5樣蛋白試劑盒
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