ELISA試劑盒在液相色譜中，可供挑選的活動相的規模較寬，且還可組成多元溶劑體系與不同配比，在固定相斷定后，活動相的種類、配比、ph值及添加劑等能明顯影響別離作用，因此HPLC中活動相的挑選至關重要。
（1）液-固吸附色譜的活動相：在液-固吸附色譜法中，活動相對別離的影響比較明顯，操控別離挑選性和別離速度主要靠挑選適合的活動相來完成。一般選用二元以上的混合溶劑體系，在初級性溶劑如烴類中，參加是兩極性溶劑如、春蕾等以調理溶劑體系的極性。
（2）ELISA試劑盒化學鍵合色譜的活動相：可選用固定份額（等度洗脫）或按規則程序改動份額（梯度洗脫）的溶劑組成作為活動相體系，在液-固吸附色譜法中，一般選用二元以上的混合溶劑體系，在初級性溶劑如烴類中，參加是兩極性溶劑如、醇類等以調理溶劑體系的極性；在液-液分配色譜法中，活動相極性較小于固定相極性稱為正相色譜；活動相極性大于固定相極性稱為返現色譜。正相色譜用于別離極性及中等極性的分子型化合物；返現色譜用于別離非極性至中等極性的分子型化合物。在藥物剖析中，檢討色譜運用zui廣。在反相色譜法中，因為固定相對錯極性的，所以，活動相極性越弱，其洗脫才能越強。典型的反相色譜法是用非極性固定相，常用十八烷基鍵合相（ODS或C18),活動相用甲醇-水或乙腈-水。洗脫時，極性打的組分線流出色譜柱，極性小的組分后流出色譜柱。因為C18鍵在水相環境中不易堅持擴展狀況，故關于反向色譜體系，活動相中有機溶劑的份額一般不低于5%。不然C18鍵的隨機彎曲將導致組分保存值改變，造成色譜體系不穩定。
反向鍵合相色譜的活動相常選用下列三種：1 部分含水溶劑；以水為根底溶劑，在參加一定量可與水互溶的有機極性調理劑（如甲醇、乙腈、四氫呋喃），適用于別離中等極性、弱極性藥物、常用甲醇-水、乙腈-水體系。2 非水溶劑：用于別離疏水性物質，尤其在柱填料外表鍵合的十八烷基硅膠量較大時，固定相對疏水化合物有反常的保存才能，需求有機溶劑，可在乙腈或甲醇中參加二氯甲烷或四氫呋喃（稱非水反相色譜）。3緩沖溶液；適用于可溶于水病可解離的化合物，如蛋白質、多肽及弱酸、弱堿類成分。緩沖液及其PH值不同會影響組分的保存值，常用的緩沖液有三乙胺磷酸鹽、磷酸鹽、醋酸鹽溶液，選用的ph值應運用溶質盡可能成為非解離方式，使固定相有較大保存才能（反向離子按捺色譜）。
爭相鍵合相色譜的活動相一般選用飽滿烷烴（如正乙烷）中參加異丙醚等極性較大的溶劑作為極性調理劑，經過調理劑的濃度來改動溶劑強度，常選用二元以上的混合溶劑體系，可用薄層色譜（TLC）探究適合的活動相。
ELISA試劑盒返現離子對色譜的活動相為極性較強的水體系混合溶劑，zui常用的是甲醇-水、乙腈水中參加0.003-0.01mol/L的離子對試劑，調理有機溶劑的份額使組分K值在適合規模。離子對試劑的性質和濃度、活動相的PH值及活動相中有機溶劑的性質和份額都會影響組分的保存值和別離的挑選性。
