每種ELISA試劑盒試劑都有其反應方式，其間溫度和溫育時間操控是重要因素。因孵育溫度高，反應時間長，會構成整板本底高，陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴，ELISA試劑盒反應板不宜疊放，以保證各板溫度都能敏捷平衡，為避免蒸發，板上應加蓋。
作為記載測定效果的儀器，ELISA試劑盒酶標儀的功用安穩與否，抉擇效果的可靠度。首要酶標儀應守時進行維護，對濾光片要守時校正；其次酶標儀波長設置要準確，運用雙波長，一個檢查波長，一個參比波長，以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異構成的光煩擾。此外，ELISA試劑盒在用酶標儀讀數時先擦試微孔板底部并壓平板條。
由于各種酶標儀功用有所不同，ELISA試劑盒運用中應詳細閱覽說明書綜上所述，盡管如今上以及我國有了有些規范血清或參比血清（血清盤），但是酶聯免疫吸附技術如今在技術上沒有做到規范化。受方法學及技術條件的束縛，在酶聯免疫吸附測定中有時不行避免的會出現必定的非特異性，ELISA試劑盒我們可以經過以上方法把非特異性顯色降至zui低限底，然后進步檢查的特異性，并得到更準確、可靠的試驗效果。
