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公司動態(tài)

ELISA樣本處理請從試驗前開端

閱讀:91發(fā)布時間:2018-3-9

ELISA試劑盒試驗之前必須有充足完好的處理方案,這樣才干有用的確保試驗成果的和真實(shí)性。首要咱們要先了解,elisa試劑盒試驗前樣本的處理辦法 在搜集樣本前都必須有一個完好的方案,是否滿足安穩(wěn)。對搜集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆谩jP(guān)于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,-70℃凍存?zhèn)溆谩?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
3. 尿液:
ELISA試劑盒用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測排泄性的成份時,用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。
5. 培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。經(jīng)過反復(fù)凍融或參加安排蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
6. 安排標(biāo)本
ELISA試劑盒切開標(biāo)本后,稱取分量。參加一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本消融后依然堅持2-8℃的溫度。參加一定量的PBS(PH7.4),或安排蛋白萃取試劑, 用手藝或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。分裝后一份待檢測,其他冷凍備用。


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