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技術(shù)文章

ELISA試劑盒運(yùn)用抗原的純度

閱讀:134發(fā)布時(shí)間:2017-10-31

因?yàn)?strong>ELISA試劑盒酶聯(lián)免疫吸附技能現(xiàn)在在技能上缺乏標(biāo)準(zhǔn)化,盡管現(xiàn)在上以及我國(guó)有了部分標(biāo)準(zhǔn)血清或參比血清(血清盤(pán))。因而,血標(biāo)本在收集處理時(shí)應(yīng)當(dāng)心,在冰箱中保存不易過(guò)久。在酶聯(lián)免疫測(cè)定尤其是直接ELISA試劑盒中,試劑的特異性取決于。標(biāo)本凝聚不全時(shí),血清中會(huì)殘留部分纖維蛋白原,也易形成假陽(yáng)性。檢修標(biāo)本中含有酶符號(hào)物的攪擾物,內(nèi)源性攪擾物類風(fēng)濕因子(RF)、黃疸等,類風(fēng)濕因子是可作用于多種動(dòng)物以及人IgGFc段的自身抗體,多數(shù)為IgM類,能充當(dāng)抗原成分與固相及酶標(biāo)抗體反應(yīng),然后呈現(xiàn)非特異性顯色。
如有細(xì)菌污染,ELISA試劑盒菌體中可能含有內(nèi)源性HRP(辣根過(guò)氧化酶),有國(guó)內(nèi)報(bào)導(dǎo)酶免HBsAgELISA試劑盒測(cè)溶血標(biāo)本時(shí)可形成假陽(yáng)性。ELISA試劑盒中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種,以微量滴定板zui為常見(jiàn)。外源性攪擾物,經(jīng)常因樣品收集、儲(chǔ)存、處理不妥形成如樣品溶血,被細(xì)菌污染,標(biāo)本凝聚不全等。
ELISA試劑盒如在冰箱中保存過(guò)久,其間的IgG可發(fā)作聚合,在直接法ELISA試劑盒中可使本底加深。但因?yàn)槭芊椒▽W(xué)及技能條件的約束,在酶聯(lián)吸附測(cè)定中有時(shí)不可避免的會(huì)泛起必定的非特異性,但我們能夠經(jīng)過(guò)以上辦法把非特異性顯色降至zui低限底,然后前進(jìn)檢測(cè)的特異性,并得到更正確、牢靠的試驗(yàn)成果。


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