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C-33A細(xì)胞-化學(xué)試劑

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更新時間：2017-07-24 13:42:39瀏覽次數(shù)：90次

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  細(xì)胞生物學(xué)

小鼠原代細(xì)胞

兔原代細(xì)胞

人原代細(xì)胞

其它原代細(xì)胞

大鼠原代細(xì)胞

其他源性細(xì)胞

小鼠源性細(xì)胞

大鼠源性細(xì)胞

人源性細(xì)胞

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上海機(jī)純實業(yè)有限公司

經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：9950條

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聯(lián)系人：胡珍珍（經(jīng)理）

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產(chǎn)品簡介

產(chǎn)地	國產(chǎn)	加工定制	是
適用領(lǐng)域	科研

C-33A細(xì)胞經(jīng)過多年的磨練打拼，如今倍受廣大科研者們以及經(jīng)銷商的青睞，豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時間、競爭力的價格，所有這些保證了我們向您提供的*的服務(wù)。

詳細(xì)介紹

C-33A細(xì)胞
細(xì)胞介紹：
該細(xì)胞系由AuerspergN建立，源于活檢標(biāo)本。p53+，pRB+，在273位密碼子發(fā)生點突變。
本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1.準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，90%;北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號 16000-044)，10%。
2.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37°C，培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%。
3. 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細(xì)胞處理：
復(fù)蘇細(xì)胞：將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入lmL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
C-33A細(xì)胞細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入lmL培養(yǎng)液后吹勻。移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行，zui后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每lml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。

注意事項：
收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們。
所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

細(xì)胞特性：
1)形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長
2)含量：>lxl06 個/mL
3)污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
4)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝

細(xì)胞接受后的處理：
1.收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2.請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養(yǎng)約 2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4. 如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5.接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉谩?br />細(xì)胞用途：僅供科研使用。

關(guān)鍵詞：培養(yǎng)箱顯微鏡