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人正常肝細胞(L-02)-化學試劑

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-07-24 16:02:56瀏覽次數:203次

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產品簡介
產地 國產 加工定制
適用領域 科研    

人正常肝細胞 (L-02)經過多年的磨練打拼,如今倍受廣大科研者們以及經銷商的青睞,豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、競爭力的價格,所有這些保證了我們向您提供的*的服務。

詳細介紹

人正常肝細胞(L-02)
細胞介紹:
L-02細胞建系鑒定于1980年。該細胞是一株正常肝細胞系,具有典型的肝細胞形態學特征,可用于多種實驗研究。
細胞培養步驟:
1)培養基及培養凍存條件準備:
1.準備 RPIVM-1640 培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號 21875-091),80%;北美胎牛血清,20%。
2.培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱 濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

2)細胞處理:
復蘇細胞:將含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將 細胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢 查細胞密度。
人正常肝細胞(L-02)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中,置于37°C培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行,zui后的重懸液使用血清。加DMSO至zui終濃度為10%,加入DMSO后迅速混勻,按每lml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于 1X106個細胞凍存。

注意事項:
收到細胞后,若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
瓶中。

細胞特性:
1)來源:肝臟
2)形態:上皮細胞樣,貼壁生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者lmL凍存管包裝

人正常肝細胞(L-02)運輸和保存:使用含有優質胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入*使用的培養基后轉移至l〇cm培養皿或者T25培養瓶中培養,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途:僅供科研使用。

關鍵詞:培養箱 顯微鏡

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