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721可見分光光度計使用方法

閱讀：6183 發(fā)布時間：2018-6-5

    1.接通電源，打開儀器開關(guān)，掀開樣品室暗箱蓋，預(yù)熱10分鐘。2.將靈敏度開關(guān)調(diào)至“1”檔（若零點調(diào)節(jié)器調(diào)不到“0”時，需選用較。）3.根據(jù)所需波長轉(zhuǎn)動波長選擇鈕。4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內(nèi)，使空白管對準(zhǔn)光路。5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點調(diào)節(jié)器，使讀數(shù)盤指針指向T=0處。6.蓋上暗箱蓋，調(diào)節(jié)“100”調(diào)節(jié)器，使空白管的T=100，指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。7.比色完畢，關(guān)上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。

    原理

    光是一種電磁波,具有一定的波長和頻率。可見光的波長范圍在400~760nm，紫外光為200~400nm，紅外光為760~500000nm。可見光因波長不同呈現(xiàn)不同顏色，這些波長在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)不同顏色的光稱單色光。太陽或鎢絲等發(fā)出的白光是復(fù)合光，是各種單色光的混合光。利用棱鏡可將白光分成按波長順序排列的各種單色光，即紅、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫等，這就是光譜。有色物質(zhì)溶液可選擇性地吸收一部分可見光的能量而呈現(xiàn)不同顏色，而某些無色物質(zhì)能特征性地選擇紫外光或紅外光的能量。物質(zhì)吸收由光源發(fā)出的某些波長的光可形成吸收光譜，由于物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)不同，對光的吸收能力不同，因此每種物質(zhì)都有特定的吸收光譜，而且在一定條件下其吸收程度與該物質(zhì)的濃度成正比，分光光度法就是利用物質(zhì)的這種吸收特征對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的方法。

    在比色分析中，有色物質(zhì)溶液顏色的深度決定于入射光的強(qiáng)度、有色物質(zhì)溶液的濃度及液層的厚度。當(dāng)一束單色光照射溶液時，入射光強(qiáng)度愈強(qiáng)，溶液濃度愈大，液層厚度愈厚，溶液對光的吸收愈多，它們之間的關(guān)系，符合物質(zhì)對光吸收的定量定律，即Lambert-Bear定律。這就是分光光度法用于物質(zhì)定量分析的理論依據(jù)。

    注意事項

    1、該儀器應(yīng)放在干燥的房間內(nèi)，使用時放置在堅固平穩(wěn)的工作臺上，室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風(fēng)，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。

    2、使用本儀器前，使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應(yīng)該對儀器的安全性能進(jìn)行檢查，電源接線應(yīng)牢固，通電也要良好，各個調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再按通電源開關(guān)。

    使用方法

    721型分光光度計其波長范圍360～800nm，色散元件為三角棱形.

    1.檢查儀器各調(diào)節(jié)鈕的起始位置是否正確，接通電源開關(guān)，打開樣品室暗箱蓋，使電表指針處于“0”位，預(yù)熱20min后，再選擇須用的單色光波長和相應(yīng)的放大靈敏度檔，用調(diào)“0”電位器調(diào)整電表為T=0%。

    2.蓋上樣品室蓋使光電管受光，推動試樣架拉手，使參比溶液池（溶液裝入4/5高度，置*格）置于光路上，調(diào)節(jié)透射比調(diào)節(jié)器，使電表指針指T=。

    3.重復(fù)進(jìn)行打開樣品室蓋，調(diào)0，蓋上樣品室蓋，調(diào)透射比為的操作至儀器穩(wěn)定。

    4.蓋上樣品室蓋，推動試樣架拉手，使樣品溶液池置于光路上，讀出吸光度值。讀數(shù)后應(yīng)立即打開樣品室蓋。

    5.測量完畢，取出比色皿，洗凈后倒置于濾紙上晾干。各旋鈕置于原來位置，電源開關(guān)置于“關(guān)”，拔下電源插頭。

    6.放大器各檔的靈敏度為：“l”×1倍；“2”×10倍；“3”×20倍，靈敏度依次增大。由于單色光波長不同時，光能量不同，需選不同的靈敏度檔。選擇原則是在能使參比溶液調(diào)到T=處時，盡量使用靈敏度較低的檔，以提高儀器的穩(wěn)定性。改變靈敏度檔后，應(yīng)重新調(diào)“0”和“100”。

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