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腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)方法

時間:2017/5/25閱讀:406
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腫瘤細(xì)胞是血液、淋巴和所有哺乳動物組織類型中所見的吞噬細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞是造血系統(tǒng)中可塑性zui強(qiáng)的一種細(xì)胞,所有組織中都有這種細(xì)胞,并且其也具有*的功能多樣性。它們在正常發(fā)育、體內(nèi)平衡、組織修復(fù)和對病原體的免疫反應(yīng)中起很多不同作用。它們的多樣性意味著,幾乎每一種人類疾病都涉及它們,它們也是主要治療目標(biāo),因為它們的功能可以被加強(qiáng)或抑制,以改變疾病的結(jié)果。
這個細(xì)胞生長快,條件好時24h內(nèi)能分裂兩次至少。而且喜歡扎堆,所以2天就要傳代,不是真的空間不夠,而是細(xì)胞都擠在一起。所以,如果瓶子里細(xì)胞密度小,培養(yǎng)基2天還是很好,可是細(xì)胞卻扎堆,需要傳了,這樣培養(yǎng)基就浪費了,我覺得應(yīng)該保持瓶中的細(xì)胞密度在20~40%左右,分裂2~3次就傳代,這時剛好培養(yǎng)基發(fā)黃。細(xì)胞太少就浪費培養(yǎng)基了。
這個細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞,就是M0,未分化的腫瘤細(xì)胞,外觀是圓形高折光,貼壁非常快,10min內(nèi)能貼80%,也容易脫落,無*拍打200下或者*室溫30s輕輕拍打都能下來60~80%,不過無*吹打是吹不下來的。
如果培養(yǎng)條件不好,它會分化,變成多邊形,從高折光的小圓亮點變成灰色的一小片,變得粘附非常緊,所以我覺得應(yīng)該控制消化時間和拍打力度,不要過分追求把所有細(xì)胞都弄下來,這樣一來影響狀態(tài)好的未分化圓形細(xì)胞活力,另一方面會把狀態(tài)不好的分化細(xì)胞弄下來,不如縮短*時間到1min內(nèi),把分化過的高粘附細(xì)胞留在瓶里,正好起到對細(xì)胞分化狀態(tài)的選擇作用。
傳代時首先無*拍打,能弄下來約50%的細(xì)胞,然后加*拍打30s,鏡下觀察,一般30s剛剛好,剩下未脫落的都是分化的形態(tài)不好的細(xì)胞,這種腫瘤細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng),如果要回到圓形,可以用*消化后傳代。

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