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如何用臺盼蘭計數(shù)人源細(xì)胞?

時間:2017-12-22閱讀:113
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用無血清培養(yǎng)基把人源細(xì)胞懸液稀釋到200-2000個/毫升,在0.1毫升的細(xì)胞中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計數(shù)板計數(shù)細(xì)胞。活細(xì)胞排斥臺盼蘭,因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞。
DMSO等級和無菌過濾方式為何?
       冷凍保存使用DMSO 等級,必須為Tissue culture grade DMSO(如Sigma D2650), 其本身即為無菌狀況, *次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4℃,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO 裂解而釋出有害物質(zhì), 并可減少污染機(jī)會。若要過濾DMSO, 則須使用耐DMSO Nylon材質(zhì)濾膜。
細(xì)胞欲冷凍保存時, 細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?
冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x106cells/ml,人源細(xì)胞融合瘤細(xì)胞則以5x106cells/ml vial為宜。
250    用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)(USDA-FSIS方法)    BGS Agar    BGS 瓊脂
250    用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)    Brilliant Green Agar    煌綠瓊脂
250    用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)    Brilliant Green Agar w/Sulfadiazine    煌綠黃胺嘧啶瓊脂
250    用于沙門氏菌,志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))    Salmonella Shigella Agar    SS 瓊脂    
250    用于沙門氏的分離培養(yǎng)(MERCK方法)    MSRV Medium,Modified    改良MSRV培養(yǎng)基
250    用于乳酸菌檢測和分離培養(yǎng)(ACUMEDIA)    Lactobacillus Selective Agar    乳酸桿菌選擇性瓊脂
人源細(xì)胞

 

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