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產品名稱:ATP-檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒50管/48樣
規格:50管/48樣
測試方法:紫外分光光度法
測定意義:
ACL(EC4.1.3.8)是脂肪酸合成中的關鍵酶,其催化產生的乙酰輔酶A可用于脂肪酸合成和碳鏈延長、黃酮類物質合成、氨基酸合成等。
ATP-檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒50管/48樣測定原理:
ACL在ATP和輔酶A存在的情況下催化檸檬酸裂解為乙酰輔酶A、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸鹽。蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm測定NADH減少速率,計算ACL活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水
ATP-檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒50管/48樣樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備:
細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量
(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細菌或細胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
ATP-檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒50管/48樣優點如下:
1、快速簡便:操作時間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規操作取樣量50l, 酶標儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效;
4、再現性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗: X =99%;
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強;
7、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養細胞以及細胞培養上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物,歡迎。
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