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非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A實驗方法

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更新時間:2017-06-02 21:28:55瀏覽次數:164次

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非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A實驗方法培養的前一周內出現質量問題, 客戶可憑細胞的照片以及書面形式的細胞培養實驗操作過程提供給我公司。 經公司技術人員核實認定為可以予以重發的情況,由公司再免費提供一次細胞。

公司專注于細胞培養及細胞銷售的細胞生物學技術研發的高科技企業,主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A實驗方法技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內外細胞研究機構建系。
細胞名稱 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A實驗方法
形態特性  上皮樣細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  Vero-HCV-NS5A細胞整合有丙型肝炎病毒的NS5A基因,能穩定表達NS5A蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。 
培養條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C35
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權限 A類
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A實驗方法處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的)培養瓶外部。
2、肉眼觀察培養基,若出現渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續培養。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養液后置于37℃,5%CO 2的培養箱中繼續培養。若細胞密度達到80%以上或存在成團現象,建議用0.25%*消化后傳代培養。
5、如果細胞為凍存狀態,可將其繼續放入液氮中繼續保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養瓶中,再加入相應的細胞培養液,放于37℃培養箱中繼續培養。
細胞培養知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發生細胞數目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養時出現細胞數目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養時出現存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。酸水解酪蛋
〖英文名稱〗:Casein acid hydrolysate;Casein hydrolysate pancreatic
〖其他名稱〗:酸水解酪蛋;酸水解干酪素
〖號〗:65072-00-6
〖級別〗:BR
總氮:≥8%
氨基氮:≥4%
〖化物〗:≤30%
灰份:≤40%
〖水份〗:≤5%
澄清度:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:以干酪素為原料,經酸水解活性炭脫色處理精致而成的乳色至淺黃色粉末,極易吸濕。易溶于水,不溶于乙迷和甲醇
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)細菌學培養基用。提供細菌生長所需的生長因子
〖保存〗:RT
酸水解干酪素
〖英文名稱〗:Casein acid hydrolysate;Casein hydrolysate pancreatic
〖其他名稱〗:酸水解酪蛋;酸水解干酪素
〖號〗:65072-00-6
〖級別〗:BR
總氮:≥8%
氨基氮:≥4%
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A實驗方法〖化物〗:≤30%
灰份:≤40%
〖水份〗:≤5%
澄清度:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:以干酪素為原料,經酸水解活性炭脫色處理精致而成的乳色至淺黃色粉末,極易吸濕。易溶于水,不溶于乙迷和甲醇
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)細菌學培養基用。提供細菌生長所需的生長因子
〖保存〗:RT
酪蛋水解物
〖英文名稱〗:Casamino acid
〖其他名稱〗:酪蛋水解物
〖級別〗:BR
Total nitrogen:≥8.7%
Amino nitrogen:≥5.3%
Moisture:≤4.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或黃色粉末,極易吸濕。易溶于堿性水
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)配制培養基用

 

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