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人腦星形膠質母細胞瘤;U-87 MG U87MG;U87 MG
公司專注于細胞培養及細胞銷售的細胞生物學技術研發的高科技企業,主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、Cas9穩定表達的人癌細胞;MCF7-Cas9-544技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內外細胞研究機構建系。
細胞名稱 Cas9穩定表達的人癌細胞;MCF7-Cas9-544
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使MCF7細胞穩定表達Cas9-Flag-Puromycin,經2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;2ug/ml Puromycin
傳代方法 1:3~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,10;D12S391:18,20;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:14,14;D19S433:13,14;D21S11:30,30;D2S1338:21,23;D3S1358:16,16;D5S818:11,12;D6S1043:12,18;D7S820:8,9;D8S1179:10,14;FGA:23,25;Penta E:7,12;TH01:6,6;TPOX:9,12;vWA:14,15
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩定表達的人癌細胞;MCF7-Cas9-544處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的)培養瓶外部。
2、肉眼觀察培養基,若出現渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續培養。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養液后置于37℃,5%CO 2的培養箱中繼續培養。若細胞密度達到80%以上或存在成團現象,建議用0.25%*消化后傳代培養。
5、如果細胞為凍存狀態,可將其繼續放入液氮中繼續保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養瓶中,再加入相應的細胞培養液,放于37℃培養箱中繼續培養。
細胞培養知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發生細胞數目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養時出現細胞數目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養時出現存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cβ3(PLCβ3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Phospholipase C Beta 3, Phosphoinositide Specific (PLCb3)48T/96T
糖磷脂酰肌醇(GPI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Glycophosphatidylinositol (GPI)48T/96T
胸腎表達趨化因子(BRAK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Breast And Kidney Expressed Chemokine (BRAK)48T/96T
皮膚T-細胞虜獲趨化因子(CTACK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cutaneous T-Cell Attracting Chemokine (CTACK)48T/96T
D-二聚體(D2D)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Oryctolagus cuniculus (Rabbit)ELISA Kit for D-Dimer (D2D)48T/96T
抑制素βC(INHβC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Inhibin Beta C (INHbC)48T/96T
Endoglin蛋白(ENG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Endoglin (ENG)48T/96T
肝脂酶(LIPC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Lipase, Hepatic (LIPC)48T/96T
肝脂酶(LIPC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Lipase, Hepatic (LIPC)48T/96T
肝脂酶(LIPC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Lipase, Hepatic (LIPC)48T/96T
鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱγ(CAMK2γ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Calcium/Calmodulin Depende Protein Kinase II Gamma (CAMK2g)48T/96T
血管細胞粘附分子1(VCAM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Vascular Cell Adhesion Molecule 1 (VCAM1)48T/96T
腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa)48T/96T
干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Ierferon Alpha (IFNa)48T/96T
α-內啡肽(αEP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Alpha-Endorphin (aEP)48T/96T
單核細胞趨化蛋白1(MCP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 1 (MCP1)48T/96T
巨噬細胞移動抑制因子(MIF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF)48T/96T
胰島素(INS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Insulin (INS)48T/96T
金屬硫蛋白1(MT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Bos taurus; Bovine (Cattle)ELISA Kit for Metallothionein 1 (MT1)48T/96T
干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Ierferon Gamma (IFNg)48T/96T
白介素6(IL6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Ierleukin 6 (IL6)48T/96T
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