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更新時間:2017-06-05 15:11:30瀏覽次數(shù):109次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤;U-87 MG U87MG;U87 MG
公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、Cas9穩(wěn)定表達的人癌細胞;231-Cas9-549技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內(nèi)外細胞研究機構(gòu)建系。
細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人癌細胞;231-Cas9-549
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Puromycin,經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;2ug/ml Puromycin
傳代方法 1:2~1:4傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:12,13;D12S391:17,18;D13S317:13,13;D16S539:12,12;D18S51:11,16;D19S433:11,14;D21S11:30,33.2;D2S1338:21,21;D3S1358:16,16;D5S818:12,12;D6S1043:18,18;D7S820:8,8;D8S1179:13,13;FGA:22,23;Penta E:11,11;TH01:7,9.3;TPOX:8,9;vWA:15,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人癌細胞;231-Cas9-549處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。葡萄糖氧化酶(GOD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Glucose Oxidase (GOD)48T/96T
趨化因子C-X3-C-基元受體1(CX3CR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Chemokine C-X3-C-Motif Receptor 1 (CX3CR1)48T/96T
神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Neuronal Apoptosis Inhibitory Protein (NAIP)48T/96T
親環(huán)素D(CYPD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cyclophilin D (CYPD)48T/96T
纖溶酶(Fbn)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GeneralELISA Kit for Fibrinolysin (Fbn)48T/96T
血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Plaet Membrane Glycoprotein IV (GP4)48T/96T
殺傷細胞凝集素樣受體亞家族A成員1(KLRA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Killer Cell Lectin Like Receptor Subfamily A, Member 1 (KLRA1)48T/96T
白三烯E4(LTE4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GeneralELISA Kit for Leukotriene E4 (LTE4)48T/96T
前列腺素F2α(PGF2α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GeneralELISA Kit for Prostaglandin F2 Alpha (PGF2a)48T/96T
白介素7(IL7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Ierleukin 7 (IL7)48T/96T
Toll樣受體2(TLR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Toll Like Receptor 2 (TLR2)48T/96T
Toll樣受體6(TLR6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Toll Like Receptor 6 (TLR6)48T/96T
髓樣前體細胞抑制因子2(MPIF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2 (MPIF2)48T/96T
多巴胺受體D5(DRD5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Dopamine Receptor D5 (DRD5)48T/96T
鈣調(diào)磷酸酶(CaN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Calcineurin (CaN)48T/96T
胱天蛋白酶12(P12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Caspase 12 (P12)48T/96T
熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Heat Shock Transcription Factor 4 (HSF4)48T/96T
丙酮酸脫氫酶激酶同工酶4(PDK4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4 (PDK4)48T/96T
Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Procollagen I N-Terminal Propeptide (PINP)48T/96T
維甲酸受體α(RARα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Retinoic Acid Receptor Alpha (RARa)48T/96T
磷脂酰甘油(PG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GeneralELISA Kit for Phosphatidylglycerol Cas9穩(wěn)定表達的人癌細胞;231-Cas9-549(PG)48T/96T
磷脂酸(PA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GeneralELISA Kit for Phosphatidic Acid (PA)48T/96T
白介素1β(IL1β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Chicken (Gallus)ELISA Kit for Ierleukin 1 Beta (IL1b)48T/96T
免疫球蛋白A(IgA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Chicken (Gallus)ELISA Kit for Immunoglobulin A (IgA)48T/96T
信號傳導轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 6 (STAT6)48T/96T
信號傳導轉(zhuǎn)錄激活因子5A(STAT5A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 5A (STAT5A)48T/96T
信號傳導轉(zhuǎn)錄激活因子4(STAT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 4 (STAT4)48T/96T
Toll樣受體2(TLR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Toll Like Receptor 2 (TLR2)48T/96T
骨鈣素(OC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Bos taurus; Bovine (Cattle)ELISA Kit for Osteocalcin (OC)48T/96T
UDP葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for UDP Glucose Ceramide Glucosyltransferase (UGCG)48T/96T
胰島素(INS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Insulin (INS)48T/96T
胱天蛋白酶7(P7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Caspase 7 (P7)48T/96T
胱天蛋白酶7(P7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Caspase 7 (P7)48T/96T
胱天蛋白酶7(P7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Caspase 7 (P7)48T/96T
*4(KLK4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Kallikrein 4 (KLK4)48T/96T
*4(KLK4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Kallikrein 4 (KLK4)48T/96T
*4(KLK4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Kallikrein 4 (KLK4)48T/96T
基質(zhì)金屬蛋白酶23B(MMP23B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B)48T/96T
髓細胞觸發(fā)受體1(TREM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 1 (TREM1)48T/96T
窖蛋白(CAV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1)48T/96T
Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 2 (COL1a2)48T/96T
Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 2 (COL1a2)48T/96T
Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 2 (COL1a2)48T/96T
非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Enolase, Non Neuronal (NNE)48T/96T
肌肽(CAR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GeneralELISA Kit for Carnosine (CAR)48T/96T
防御素β2(DEFβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Defensin Beta 2 (DEFb2)48T/96T
早期生長應答因子2(EGR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Early Growth Response Protein 2 (EGR2)48T/96T
脂氧素A4(LXA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GeneralELISA Kit for Lipoxin A4 (LXA4)48T/96T
胰脂肪酶(PL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Lipase, Pancreatic (PL)48T/96T
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