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雜交瘤細胞株;7H8

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更新時間:2017-06-06 18:48:49瀏覽次數:80次

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雜交瘤細胞株;7H8,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

公司專注于細胞培養及細胞銷售的細胞生物學技術研發的高科技企業,主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、雜交瘤細胞株;7H8技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內外細胞研究機構建系。
細胞名稱 雜交瘤細胞株;7H8
形態特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 未定
雜交瘤細胞株;7H8處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的)培養瓶外部。
2、肉眼觀察培養基,若出現渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續培養。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養液后置于37℃,5%CO 2的培養箱中繼續培養。若細胞密度達到80%以上或存在成團現象,建議用0.25%*消化后傳代培養。
5、如果細胞為凍存狀態,可將其繼續放入液氮中繼續保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養瓶中,再加入相應的細胞培養液,放于37℃培養箱中繼續培養。
細胞培養知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發生細胞數目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養時出現細胞數目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養時出現存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。酸二酯鍵連接(5'-磷酸基團和3'-羥基末端),底物分子為多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRNA和ssDNA,分子之間的小的連接底物是核苷3',5'-二磷酸,而分子內連接的小底物是8個堿基的寡核苷酸。配套提供反應緩沖液、ATP和BSA溶液。催化3'→5'磷酸二酯鍵的形成,使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羥基末端連接。作用底物包括單鏈RNA、DNA及二核苷焦磷酸。隨酶提供10X 反應緩沖液
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)連接RNA和RNA ;RNA3'-末端標記胞嘧啶3',5'-雙[a-32P]磷酸; tRNA的特異性修飾;合成寡核苷酸的環化;寡聚脫氧核糖核苷酸與單鏈cDNA連接,用于5'RACE(快速擴增cDNA末端)分析
〖保存〗: -20°C
T4 DNA連接酶
〖英文名稱〗:T4 DNA Ligase 
〖號〗:9015-85-4
分子量:55.3kDa,單體
〖級別〗:BR
來源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
活性定義:是指在ATP-PPi交換反應中,37℃、30分鐘內將1nmol [32PPi]轉換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個weiss單位相當于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位:20ul反應體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產物所需的酶量) 
抑制劑:當反應體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時,可強烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:T4 DNA Ligase與DNA結合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現象,電泳前需處理樣本或分子量標準。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴〖保存〗;轉化時,連接產物的體積不得超過感受態細胞體積中的10%;電轉化之前,先用方抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經乙醇沉淀純化抽提產物
雜交瘤細胞株;7H8質量控制:測試表明無內切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測:粘性末端或平末端DNA的連接能力
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復合體中缺口的修復;連接酶介導的RNA檢測;位點特異性突變

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