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雜交瘤細胞株;3H3F6

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更新時間:2017-06-06 18:49:40瀏覽次數:122次

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公司專注于細胞培養及細胞銷售的細胞生物學技術研發的高科技企業,主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、雜交瘤細胞株;3H3F6技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內外細胞研究機構建系。
細胞名稱 雜交瘤細胞株;3H3F6
形態特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 未定
雜交瘤細胞株;3H3F6處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的)培養瓶外部。
2、肉眼觀察培養基,若出現渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續培養。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養液后置于37℃,5%CO 2的培養箱中繼續培養。若細胞密度達到80%以上或存在成團現象,建議用0.25%*消化后傳代培養。
5、如果細胞為凍存狀態,可將其繼續放入液氮中繼續保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養瓶中,再加入相應的細胞培養液,放于37℃培養箱中繼續培養。
細胞培養知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發生細胞數目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養時出現細胞數目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養時出現存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。〖級別〗:BR
來源:兩個大腸桿菌菌株,一個菌株含有T7噬菌體克隆基因5,另一個菌株含有大腸桿菌克隆基因trxA
濃度:10u/ul 
活力定義:在37°C條件下,30分鐘內能使10 nmol 的脫氧核糖核苷酸摻入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量
酶活性分析混合物:40mM Tris-HCL(PH7.5), 1mM DTT, 10mM MgCL2, 0.1mg/ml BSA, 0.033mM各種dNTP,0.4MBq/ML(3H)-dTTP和0.5mM堿性變性的牛胸腺DNA
〖保存〗緩沖液組分:20mM 磷酸鉀(PH7.4), 0.1mM EDTA, 1mM DTT和50%(v/v)甘油
10×反應緩沖液:400mM Tris-HCL(PH7.5,25℃), 100mM MgCL2, 10mM DTT
抑制劑:金屬螯合劑,修飾試劑(無水酸和N-乙基順丁烯二酰亞胺可使3'→5' 外切核酸酶失活,但不影響聚合酶活性
失活:75℃加熱10分鐘
質量控制:測試表明無內切脫氧核糖核酸酶污染
使用注意:37℃分析時需要短時間孵育
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:懸浮液,重組酶。T7 DNA聚合酶是一種模板依賴型DNA聚合酶,催化5'→3'方向的DNA合成。該DNA聚合酶具有高持續合成能力,可持續合成長片段DNA。該酶對單鏈和雙鏈DNA具有3'→5'外切核酸酶活性
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)除去殘留的基因組DNA,純化共價閉環的DNA分子;長片段引物延伸反應;DNA 3'-末端標記;定點突變位點的鏈延伸反應;DNA 5'-突出點位補平;第二鏈cDNA合成;原位檢測凋亡相關DN片段
〖保存〗:-20°C
T4 RNA連接酶
〖英文名稱〗:T4 RNA Ligase 
分子量:43.6kDa,單體
〖級別〗:BR
來源:含有T4噬菌體克隆基因63的大腸桿菌
濃度:10u/ul 
活性定義:是指在37℃、30分鐘內將1nmol 5'-[32P]-(A)12-18轉化為磷酸酶抗性形式所需的酶量
酶活性分析混合物:50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 10uM 5'-[32P]-(A)12-18(10uM 5'-末端)
〖保存〗液組分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA,0.5mM ELUGENT變性劑和50%(v/v)甘油
雜交瘤細胞株;3H3F610×反應緩沖液:500mM HEPES-NaOH(PH8.0,25℃), 100mM MgCL2, 100mM DTT
抑制劑:金屬螯合劑、SH基團修飾試劑
失活:70℃加熱10分鐘
質量控制:測試表明無內切和外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
備注:反應體系中ATP的濃度取決于連接反應的類型,*的BSA反應濃度是0.1mg/ml
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:重組酶,催化ATP依賴的分子內和分子間磷

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